一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品的制作方法

1.本发明属于医学检验技术领域，具体涉及一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品。


背景技术：

2.谷胱甘肽还原酶(gr)在人类细胞中具有极重要的生理功能，广泛存在于人体肝、肾、心红细胞、单核巨噬细胞等组织细胞中。是维持细胞中还原型谷胱甘肽(gsh)含量的主要黄素酶。在nadph参与下，谷胱甘肽还原酶催化氧化型谷胱甘肽(gssg)转化为还原型谷胱甘肽(gsh)，保持有机体内还原型谷胱甘肽(gsh)处于高水平，氧化型谷胱甘肽(gssg)处于低水平，维持体内适当还原态环境。还原型谷胱甘肽(gsh)在防止血红蛋白的氧化分解、维持巯基蛋白的活性、保证巯基蛋白的还原性及细胞的完整性具有重要的作用。
3.谷胱甘肽还原酶(gr)在肝脏里面活性最强，对保护肝细胞膜完整具有非常重要的作用意义。在众多的肝功能项目中，反映肝细胞损伤的指标以alt和ast为主。gr不同于alt和ast在肝细胞膜破裂和线粒体破裂时才能检测出来，填补肝细胞受损早期自我修复阶段至破裂进程中诊断的空白，将更有利于早期肝炎的诊断和治疗。gr与alt、ast联合检测可反馈患者肝脏实质受损状态,对肝损伤进行全程检测。
4.谷胱甘肽还原酶检测试剂盒测定值取决于校准品。谷胱甘肽还原酶的稳定性决定了校准品的质量。酶活性受储存温度、缓冲液等多种因素影响。目前，市场上含有酶的校准品多为冻干的状态以便于保持酶活性。临床应用时需要复溶，不仅操作繁琐，同时给产品校准品又引入了新的不确定度，影响校准品定值。进而导致检测结果偏差，影响临床辅助诊断。


技术实现要素：

5.本发明提供了一种谷胱甘肽还原酶检测试剂盒用校准品，通过在校准品组分中添加适量的n-乙酰半胱氨酸，使得校准品在液体状下可以稳定18个月。
6.一方面，一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，该校准品包括有机缓冲液、谷胱甘肽还原酶、防腐剂、保护剂。
7.进一步地，所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述有机缓冲液为goods缓冲液、咪唑缓冲液或三羟甲基氨基甲烷缓冲液中的一种或两种。
8.进一步地，所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述谷胱甘肽还原酶的浓度为10u/l-100u/l。
9.进一步地，所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述防腐剂为proclin-300。
10.进一步地，所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述保护剂为甘油、甘露醇或n-乙酰半胱氨酸中的一种或多种。
11.进一步地，所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述有机
缓冲液的ph为6-8。
12.进一步地，所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述proclin-300的浓度为100μl-500μl。
13.进一步地，所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述甘油浓度为1ml/l-20ml/l。
14.进一步地，所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述甘露醇浓度为1g/l-50g/l。
15.进一步地，所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述n-乙酰半胱氨酸浓度为0.5g/l-10g/l。
16.该校准品在2℃-8℃避光保存，有效期为18个月。
17.本发明具有如下有益效果：
18.1.该校准品为液体状态，能在2-8℃条件下，稳定18个月。
19.2.临床应用无需复溶，使用方便。同时减少冻干、复溶过程中对校准品定值的影响，进而检测结果更加准确。
具体实施方式
20.下面通过实施例下面通过实施例的方式进一步说明本发明，但并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。
21.实施例1
22.本发明提供一种谷胱甘肽还原酶检测试剂盒用校准品，其主要成分如下：
23.校准品组分各组分浓度goods缓冲液ph 7.5100mmol/lproclin-300100μl甘油10ml/ln-乙酰半胱氨酸0.5g/l谷胱甘肽还原酶10u/l
24.校准品的效期稳定性：在第0、3、6、9、12、15、18、19个月取两瓶校准品，每瓶测试三次。按照表1进行斜率的趋势显著性检验，计算t
p，n-2
×
s(b1)。对于95％的置信水平，当|b1|＜t
0.05，n-2
·
s(b1)时表示趋势不显著，否则趋势显著。
25.表1：t检验表
[0026][0027]
试验结果：
[0028][0029]
在0、3、6、9、12、15、18、19八个月份分别对校准品进行检测，结果|b1|＜t(0.05,n-2)*s(b1)，变化趋势不显著。因此，本发明校准品在18个月内性能稳定。
[0030]
实施例2
[0031]
本发明提供一种谷胱甘肽还原酶检测试剂盒用校准品，其主要成分如下：
[0032]
校准品组分各组分浓度咪唑缓冲液ph 7.5100mmol/lproclin-300300μl甘露醇1g/ln-乙酰半胱氨酸5g/l谷胱甘肽还原酶55u/l
[0033]
试验结果：
[0034][0035]
在0、3、6、9、12、15、18、19八个月份分别对校准品进行检测，经分析|b1|＜t(0.05,n-2)*s(b1)，变化趋势不显著。因此，本发明校准品在18个月内性能稳定。
[0036]
实施例3
[0037]
本发明提供一种谷胱甘肽还原酶检测试剂盒用校准品，其主要成分如下：
[0038]
校准品组分各组分浓度三羟甲基氨基甲烷缓冲液ph 7.8100mmol/lproclin-300500μl
甘露醇50g/ln-乙酰半胱氨酸10g/l谷胱甘肽还原酶100u/l
[0039]
试验结果：
[0040][0041]
在0、3、6、9、12、15、18、19八个月份分别对校准品进行检测，经分析|b1|＜t(0.05,n-2)*s(b1)，变化趋势不显著。因此，本发明校准品在18个月内性能稳定。
[0042]
以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。


技术特征：
1.一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，该校准品包括有机缓冲液、谷胱甘肽还原酶、防腐剂、保护剂。2.如权利要求1所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述有机缓冲液为goods缓冲液、咪唑缓冲液或三羟甲基氨基甲烷缓冲液中的一种或多种。3.如权利要求1所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述谷胱甘肽还原酶的浓度为10u/l-100u/l。4.如权利要求1所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述防腐剂为proclin-300。5.如权利要求1所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述保护剂为甘油、甘露醇或n-乙酰半胱氨酸中的一种或多种。6.如权利要求1或2所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述有机缓冲液的ph为6-8。7.如权利要求4所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述proclin-300的浓度为100μl-500μl。8.如权利要求5所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述甘油浓度为1ml/l-20ml/l。9.如权利要求5所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述甘露醇浓度为1g/l-50g/l。10.如权利要求5所述的一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，其特征在于，所述n-乙酰半胱氨酸浓度为0.5g/l-10g/l。

技术总结
本发明提供了一种谷胱甘肽还原酶检测试剂用校准品，属于医学检验技术领域。该校准品为液体状态，其组分为：有机缓冲液、谷胱甘肽还原酶、防腐剂、保护剂。本发明通过在校准品组分中添加一定浓度的N-乙酰半胱氨酸，有效保护谷胱甘肽还原酶活性，使得校准品在液体状态下可稳定保存。液体校准品使用方便，同时避免了冻干、复溶过程对校准品定值的影响。复溶过程对校准品定值的影响。


技术研发人员：吉爽爽 孟广宇 王伟
受保护的技术使用者：江苏迈源生物科技有限公司
技术研发日：2021.12.03
技术公布日：2022/3/8