一种合成漆黄素的方法与流程

1.本发明涉及药物合成技术领域，具体涉及一种漆黄素的合成方法。


背景技术：

2.漆黄素(fisetin)化学名称为2-(3,4-二羟基苯基)-3,7-二羟基-4h-苯并呋喃-4-酮，又称为3,3',4',7-四羟基黄酮，分子结构式为漆黄素是一种天然黄酮类化合物，有很好的药理活性，能改善视网膜色素上皮细胞损伤、消除紫外线诱导细胞死亡和氧自由基产生预防白内障、调节血管内皮生产因子的产生、治疗类风湿关节炎以及抑制前列腺癌、乳腺癌、子宫颈癌、血癌等细胞的增生并促进其凋亡，有显著的抗肿瘤、抗炎、抗氧化、抗凝血、抗血栓、解痉等多种药理活性，还能治疗糖尿病肾损伤、阿尔茨海默病、抑郁病症、保护神经元改善记忆力和减缓脑细胞退化等，其应用领域广、用量大，但漆黄素的价格昂贵。
3.漆黄素的来源有两种，一是从一些含有漆黄素的药用植物中提取，二是通过合成方法制取。
4.漆黄素的提取是从漆树科植物黄栌、漆树、盐肤木、木腊树以及大戟科植物余甘子、黄杨科植物黄杨等的叶、茎枝、根中分离和纯化，这也是目前市场上漆黄素的主要来源。可是提取漆黄素需要克服溶剂、脱脂脱色、固体渣处理、分离富集等诸多问题和困难，还要消耗大量的人力、物力和能耗，成本较高，得到的漆黄素纯度还不高、含量也不稳定，难以实现规模化生产，不能满足市场的需求。
5.为了满足市场用量日益增长的需要，提高漆黄素的供给量，近年来人们开始探索漆黄素的合成方法。已公开的文献有中国专利申请号为201811592833.6的“一种漆黄素的合成方法”，该方法以2,4-二羟基苯乙酮为原料，先制得3
′
,4
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二羟基-7-苄基查尔酮，再制得3
′
,4
′
,7-三羟基查尔酮，最后得纯度为98％的漆黄素，总产率为58.01％，用时超过了80h；“ryuji tsunekawa等.synthesis of fisetin and 2
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,4
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,6
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trihydroxydihyrochalcone 4
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o-β-neohesperidoside based on site-selective deacetylation and deoxygenation[j].bioscience,biotechnology and biochemistry,2018,82(8):1316-1322.”文献中公开了用槲皮素(quercetin)为原料合成漆黄素的方法，该方法经过了酸酐保护羟基、酯基消除、引入三氟甲基磺酸根、氢气还原和脱酯基等五个主要步骤，总产率为37％；“江玲，生物活性非瑟酮和相关黄酮类及其糖苷衍生物的合成研究[d].湖南大学，2009年”文献中也公开了一种漆黄素的合成方法，该方法用间苯二酚制取2-羟基-4-甲氧甲氧基苯乙酮，再依次制取2
′‑
羟基-3-甲氧基-4,4
′‑
二甲氧甲氧基查尔酮、3
′‑
甲氧基-7,4
′‑
二甲氧甲氧基黄酮醇、7,4
′‑
二羟基-3
′‑
甲氧基黄酮醇，最后制得漆黄素，
总产率为19.4％。
[0006]
总之，目前合成漆黄素存在的问题是：(1)尝试和探索合成漆黄素的文献资料尚少，比较成熟的漆黄素合成工艺技术更少；(2)主要以2,4-二羟基苯乙酮为原料，合成的步骤多，用时长，反应体系复杂，产率普遍偏低；(3)反应所用的溶剂种类繁多，使用了一些不安全的试剂，如三氟甲基磺酸酐、对甲苯磺酸、吡啶、氯甲基甲基醚、1,4-二氧六环、乙醚以及反应釜中的钯碳催化等，不适合工厂规模化生产应用；(4)羟基需要保护，反应工序冗长，还需要2次柱层析分离，产品的质量不稳定；(5)一些合成过程需要持续80h以上，还要控温加热回流，对合成的设备要求较高，生产成本高。


技术实现要素：

[0007]
本发明的目的在于克服现有漆黄素合成方法中所存在的缺陷，提出一种合成步骤少、工序简单、反应时间短、产物含量高和质量稳定，适合中小企业规模化生产的漆黄素合成方法。
[0008]
实现上述目的的技术方案是：一种合成漆黄素的方法，其特征是按照下述步骤完成，
[0009]
(1)丹皮酚和藜芦醛的缩合反应
[0010]
称量丹皮酚8.3重量份，用无水乙醇170-190重量份溶解，得溶液a；称量藜芦醛8.3重量份用无水乙醇饱和溶解,得溶液b；将溶液a移入反应罐中，加入2.4-2.7重量份氢氧化钠，在持续搅拌状态下，将溶液b在0.5h内匀速加入反应罐中，继续搅拌10h-11h，当反应液呈褐色时再继续搅拌1h-2h；
[0011]
(2)缩合产物的环合反应
[0012]
用95％乙醇溶液溶解氢氧化钠，制取质量百分含量为15％的氢氧化钠溶液c，将830-850重量份的溶液c加入步骤(1)的反应液中，0.5h内向该体系中匀速加入12-13重量份的30％过氧化氢溶液，持续搅拌6-8h，然后在0.5h内再匀速加入6-7重量份的30％过氧化氢溶液，继续搅拌反应5-6h，待反应完全后，给反应罐中加入与此时罐中反应液等体积的冰水，用浓盐酸调节其ph至中性，至出现橙黄色固体物沉淀且沉淀完全后过滤，然后冷水洗涤固体物2次；
[0013]
(3)漆黄素的生成
[0014]
将步骤(2)所得的最后固体物转移至反应罐中，用质量百分含量为23％-24％的溴化氢溶液溶解，搅拌加热回流2h-3h，用tlc法检测反应结束后，在冰水浴中冷却，再用碳酸钠饱和溶液中和至ph为5.5-6.0，当有黄色沉淀物析出时停止搅拌，静置0.5h后抽滤，冷水洗涤，得到粗品漆黄素，再用乙醇溶液重结晶后干燥，得到精品漆黄素。
[0015]
进一步，所述步骤(1)均在5℃-26℃条件下完成。
[0016]
进一步，所述步骤(3)中，用溴化氢溶液溶解步骤(2)所得的最后固体物时可加入适量的丙酮。
[0017]
本发明合成过程中的反应为：
[0018][0019]
本发明所用原料丹皮酚和藜芦醛廉价易得，合成过程简便。两种原料都是天然产物，无毒、安全，缩合反应在室温下进行，大幅度地简化了反应的工序，减少了合成步骤，缩短了合成时间，原料的转化率高，合成过程主要使用乙醇，没有使用其他有毒有害的有机溶剂，开创了一条绿色、环保、节能的合成路径。本发明最适合中小企业规模化生产。
[0020]
本发明与现有技术的区别在于：
[0021]
(1)现有的合成技术步骤长、工序复杂。现有的合成技术一般是以化工原料2,4-二羟基苯乙酮为原料，需要保护羟基、羟醛缩合、环合、羟基的脱保护等反应来获得漆黄素，合成步骤冗长，工序复杂，有的工艺还需要进行柱层析分离。本发明以天然产物丹皮酚和藜芦醛为原料，先经过claisen-schmidt condensation reaction，再通过algar-flynn-oyamada氧化环合，最后在溴化氢溶液加热使甲氧醚键断开就能合成漆黄素，合成步骤少、反应时间短，节能降耗，显著地降低了生产成本。
[0022]
(2)现有的合成技术所用的溶剂种类繁多，用了一些不安全的试剂，如三氟甲基磺酸酐、对甲苯磺酸、吡啶、氯甲基甲基醚、1,4-二氧六环、乙醚以及反应釜中的钯碳催化等。本发明全过程绿色、环保、节能，主要使用乙醇以及少量的丙酮且都能循环再套用，不再使用其他有机溶剂，避免了其他有机溶剂残留的问题。
[0023]
(3)现有的合成技术在整个合成过程中需要持续50h以上，还要加热控温，增加了生产成本。本发明在5℃-26℃的室温下进行缩合和环合，只是用溴化氢使甲氧醚键断开的过程中需加热回流，加热时间不足3h，整个反应的时间控制在30h之内，不需要复杂的分离可连续进行，省时省力。
[0024]
(4)现有的合成技术中漆黄素的产率低，且其质量不稳定。本发明使漆黄素的产率超过了82.4％，纯度在99.1％以上，其产品的质量稳定。
[0025]
(5)现有的合成技术中每一个步骤都是独立或孤立进行反应，增加了产物处理的操作和麻烦。本发明基本上达到“一锅法”，能够连续生产，合成的效率高。
具体实施方式
[0026]
下面结合实施例对本发明技术方案做出进一步详细的描述。
[0027]
实施例1
[0028]
步骤(1).丹皮酚和藜芦醛的缩合反应
[0029]
称量丹皮酚4kg，用无水乙醇81.9l在反应罐中溶解；再称量藜芦醛4kg用无水乙醇
溶解成饱和溶液；5℃下在丹皮酚的乙醇溶液中加入氢氧化钠1.15kg，搅拌均匀并持续搅拌，0.5h内将藜芦醛的乙醇饱和溶液匀速加入反应罐中，反应液逐渐变为淡黄色浑浊液，随后又变为橙黄色，在5℃下搅拌反应11h之后，反应液变得更加浑浊且呈褐色，用薄层色谱法(tlc法)检验反应液，在原料点基本消失的情况下，再搅拌2h使反应完全。
[0030]
步骤(2).缩合产物的环合反应
[0031]
向反应罐中再加入409.6l质量百分含量为15％氢氧化钠的95％乙醇溶液，0.5h内向反应罐中匀速加入5.7l的30％过氧化氢溶液，持续搅拌6h，然后在0.5h内再匀速加入2.9l的30％过氧化氢溶液，继续搅拌反应6h，其间用tlc法检验反应进程，反应结束后，给反应罐中加入与此时罐中反应液等体积的冰水，用浓盐酸调节其ph至中性，至出现橙黄色固体物沉淀且沉淀完全后过滤，然后冷水洗涤固体物2次。
[0032]
步骤(3).漆黄素的生成
[0033]
将步骤(2)所得的最后固体物转移至反应罐中，加入质量百分含量为23％的溴化氢溶液溶解固体物，可加入适量的丙酮促进溶解，固体物全部溶解无明显固体悬浮物即可，固体物由橙黄色转变为亮黄色的溶液，接通回流冷凝器，冷凝器的开口端接上尾气吸收装置吸收尾气，搅拌加热回流2h，用tlc法检测反应结束后，在冰水浴中冷却，加入饱和的碳酸钠溶液中和至ph为6.0，当有黄色沉淀物析出时停止搅拌，静置0.5h后抽滤，冷水洗涤，得到粗品漆黄素，用乙醇溶液重结晶后干燥，得到漆黄素5.68kg，产率为82.4％，hplc法定量分析纯度为99.1％。
[0034]
实施例2
[0035]
称量丹皮酚6kg，用无水乙醇137.3l在反应罐中溶解；再称量藜芦醛6kg用无水乙醇溶解成饱和溶液；15℃下在丹皮酚的乙醇溶液中加入氢氧化钠1.95kg，开启搅拌器搅拌均匀并持续搅拌，0.5h内将藜芦醛的乙醇饱和溶液匀速加入反应罐中，反应液逐渐变为淡黄色浑浊液，随后又变为橙黄色，在15℃下搅拌反应10h之后，反应液变得更加浑浊且呈褐色，tlc法检验反应液，再搅拌1.5h使反应完全。再一次性向反应罐中加入600l的质量百分含量为15％氢氧化钠的95％乙醇溶液，再在0.5h内向反应罐中匀速加入9.4l的30％过氧化氢溶液，持续搅拌8h，然后在0.5h内再次向反应罐中匀速加入5.0l的30％过氧化氢溶液，继续搅拌反应5h，其间用tlc法检验反应进程，反应结束后，给反应罐中加入与此时罐中反应液等体积的冰水，用浓盐酸调节其ph至中性，至出现橙黄色固体物沉淀且沉淀完全后过滤，然后冷水洗涤固体物2次。随后将固体物转移至反应罐中，加入质量百分含量为24％的溴化氢溶液溶解固体物，可加入适量的丙酮促进溶解，固体物全部溶解无明显固体悬浮物即可，固体物由橙黄色转变为亮黄色的溶液，接通回流冷凝器，冷凝器的开口端接上尾气吸收装置吸收尾气，搅拌加热回流3h，用tlc法检测反应结束后，在冰水浴中冷却，加入饱和的碳酸钠溶液中和至ph为5.5，当有黄色沉淀物析出时停止搅拌，静置0.5h后抽滤，冷水洗涤，得到粗品漆黄素，用乙醇溶液重结晶后干燥，得到漆黄素8.58kg，产率为83.0％，hplc法定量分析纯度为99.2％。
[0036]
实施例3
[0037]
称量丹皮酚9kg，用无水乙醇195.2l在反应罐中溶解；再称量藜芦醛9kg用无水乙醇溶解成饱和溶液。26℃下在丹皮酚的乙醇溶液中加入氢氧化钠2.82kg，开启搅拌器搅拌均匀并持续搅拌，0.5h内将藜芦醛的乙醇饱和溶液匀速加入反应罐中，反应液逐渐变为淡
黄色浑浊液，随后又变为橙黄色，在26℃下搅拌反应10h之后，反应液变得更加浑浊且呈褐色，tlc法检验反应液，再搅拌1h使反应完全。再一次性向反应罐中加入911l的质量百分含量为15％氢氧化钠的95％乙醇溶液，再在0.5h内向反应罐中匀速加入13l的30％过氧化氢溶液，持续搅拌7h，然后在0.5h内再次向反应罐中匀速加入7.6l的30％过氧化氢溶液，继续搅拌反应5h，其间用tlc法检验反应进程，反应结束后，给反应罐中加入与此时罐中反应液等体积的冰水，用浓盐酸调节其ph至中性，至出现橙黄色固体物沉淀且沉淀完全后过滤，然后冷水洗涤固体物2次。随后将固体物转移至反应罐中，加入质量百分含量为23％的溴化氢溶液溶解固体物，可加入适量的丙酮促进溶解，固体物全部溶解无明显固体悬浮物即可，固体物由橙黄色转变为亮黄色的溶液，接通回流冷凝管，冷凝管的开口端接上尾气吸收装置吸收尾气，搅拌加热回流2h，用tlc法检测反应结束后，在冰水浴中冷却，加入饱和的碳酸钠溶液中和至ph为5.8，当有黄色沉淀物析出时停止搅拌，静置0.5h后抽滤，冷水洗涤，得到粗品漆黄素，用乙醇溶液重结晶后干燥，得到漆黄素12.85kg，产率为82.9％，hplc法定量分析纯度为99.4％。
[0038]
实施例4
[0039]
称量丹皮酚12kg，用无水乙醇245.8l在反应罐中溶解；再称量藜芦醛12kg用无水乙醇溶解成饱和溶液；在20℃下在丹皮酚的乙醇溶液中加入氢氧化钠3.47kg，开启搅拌器搅拌均匀并持续搅拌，0.5h内将藜芦醛的乙醇饱和溶液匀速加入反应罐中，反应液逐渐变为淡黄色浑浊液，随后又变为橙黄色，在20℃下搅拌反应11h之后，反应液变得更加浑浊且呈褐色，tlc法检验反应液，再搅拌1h使反应完全。再一次性向反应罐中加入1200l的质量百分含量为15％氢氧化钠的95％乙醇溶液，再在0.5h内向反应罐中匀速加入17.3l的30％过氧化氢溶液，持续搅拌6h，然后在0.5h内再次向反应罐中匀速加入10.1l的30％过氧化氢溶液，继续搅拌反应6h，其间用tlc法检验反应进程，反应结束后，给反应罐中加入与此时罐中反应液等体积的冰水，用浓盐酸调节ph至中性，至出现橙黄色固体物沉淀且沉淀完全后过滤，然后冷水洗涤固体物2次。随后将固体物转移至反应罐中，加入质量百分含量为24％的溴化氢溶液溶解固体物，可加入适量的丙酮促进溶解，固体物全部溶解无明显固体悬浮物即可，固体物由橙黄色转变为亮黄色的溶液，接通回流冷凝器，冷凝器的开口端接上尾气吸收装置吸收尾气，搅拌加热回流3h，用tlc法检测反应结束后，在冰水浴中冷却，加入饱和的碳酸钠溶液中和至ph为5.5，当有黄色沉淀物析出时停止搅拌，静置0.5h后抽滤，冷水洗涤，得到粗品漆黄素，用乙醇溶液重结晶后干燥，得到漆黄素，产率为82.7％，hplc法定量分析纯度为99.3％。

技术特征：
1.一种合成漆黄素的方法，其特征在于：按照下述步骤完成，(1)丹皮酚和藜芦醛的缩合反应称量丹皮酚8.3重量份，用无水乙醇170-190重量份溶解，得溶液a；称量藜芦醛8.3重量份用无水乙醇饱和溶解,得溶液b；将溶液a移入反应罐中，加入2.4-2.7重量份氢氧化钠，在持续搅拌状态下，将溶液b在0.5h内匀速加入反应罐中，继续搅拌10h-11h，当反应液呈褐色时再继续搅拌1h-2h；(2)缩合产物的环合反应用95％乙醇溶液溶解氢氧化钠，制取质量百分含量为15％的氢氧化钠溶液c，将830-850重量份的溶液c加入步骤(1)的反应液中，0.5h内向该体系中匀速加入12-13重量份的30％过氧化氢溶液，持续搅拌6-8h，然后在0.5h内再匀速加入6-7重量份的30％过氧化氢溶液，继续搅拌反应5-6h，待反应完全后，给反应罐中加入与此时罐中反应液等体积的冰水，用浓盐酸调节其ph至中性，至出现橙黄色固体物沉淀且沉淀完全后过滤，然后冷水洗涤固体物2次；(3)漆黄素的生成将步骤(2)所得的最后固体物转移至反应罐中，用质量百分含量为23％-24％的溴化氢溶液溶解，搅拌加热回流2h-3h，用tlc法检测反应结束后，在冰水浴中冷却，再用碳酸钠饱和溶液中和至ph为5.5-6.0，当有黄色沉淀物析出时停止搅拌，静置0.5h后抽滤，冷水洗涤，得到粗品漆黄素，再用乙醇溶液重结晶后干燥，得到精品漆黄素。2.如权利要求1所述的一种合成漆黄素的方法，其特征在于：所述步骤(1)均在5℃-26℃条件下完成。3.如权利要求1或2所述的一种合成漆黄素的方法，其特征在于：所述步骤(3)中，用溴化氢溶液溶解步骤(2)所得的最后固体物时可加入适量的丙酮。

技术总结
本发明公开了一种合成漆黄素的方法，是以丹皮酚和藜芦醛为原料，先在碱性催化剂的作用下进行丹皮酚和藜芦醛的缩合反应，再通过过氧化氢进行缩合产物的环合反应，然后通过溴化氢得到粗品漆黄素，再用乙醇溶液重结晶后干燥，最后得到精品漆黄素。本发明所用原料廉价易得，两种原料都是天然产物，无毒、安全，合成过程简便；缩合反应在室温下进行，大幅度地简化了反应的工序，减少了合成步骤，整个反应的时间能够控制在30h之内；原料的转化率高，产率超过了82.4％，产品纯度在99.1％以上，且质量稳定，合成过程主要使用乙醇，没有使用其他有毒有害的有机溶剂，开创了一条绿色、环保、节能的合成路径，最适合中小企业规模化生产。最适合中小企业规模化生产。


技术研发人员：田光辉 刘存芳 张志军 王俊宏 柴大民 杜全超 张必荣 刘波 刘洋
受保护的技术使用者：陕西天谷药业有限公司
技术研发日：2021.12.02
技术公布日：2022/3/8