细胞培养系统及细胞培养方法与流程

【】本发明涉及细胞培养系统及细胞培养方法。

背景技术

0、
背景技术：

1、一般而言，贴壁细胞的培养包括将细胞悬浮液接种到平板培养皿中并通过反复更换培养基形成一些集落的步骤。在这种情况下，集落在扁平培养皿中呈现的位置是随机的，集落的大小也不同，因此很难估计培养细胞的数量。

2、为了解决这一问题，在国际公开第wo2015/125742号公开了细胞培养容器，包括一个流路，其中形成多个凹部，并且培养基板安装在与凹部相反的位置。这是一个系统，其中细胞悬浮液流入流路，将均等数量的细胞移动到每个凹部中，将流路翻转，并相应地将多个均等数量的细胞接种并培养在培养基板上。该系统使每个具有大致相同数量的细胞的细胞群可以定期接种并在培养基板上培养。

3、在国际公开第wo2015/125742号公开了在细胞接种时，每个具有大致相同数量的细胞的细胞群可以有序地集体接种在培养基板上的指定位置。因此，预计在培养后，每个具有大致相同大小的集落在培养基板上的指定位置以有序的方式培养。

4、然而，并非所有细胞都具有相同程度的培养增殖能力，因此在培养后可以形成各种大小的集落。在这种情况下，存在一个问题，即很难估计培养后的细胞数量。

技术实现思路

0、
技术实现要素：

1、本发明针对上述问题而进行。本发明的目的在于提供细胞培养系统和细胞培养方法，以便于估计培养后的细胞数量。

2、本发明采用以下构成。也就是说，提供细胞培养系统，其包括：培养基板，其上布置有多个凹部并导致细胞附着在其上；刮具，用于通过在培养基板上在多个凹部以外的区域滑动来剥离附着在培养基板上多个凹部以外的区域的细胞；以及细胞除去机构，用于从所述培养基板除去由所述刮具剥离的细胞。

3、此外，根据本发明的一个方面，提供细胞培养系统，其包括：培养基板，其上布置有多个凹部并导致细胞外基质附着在其上；刮具，用于通过在培养基板上在多个凹部以外的区域滑动来剥离附着在培养基板上多个凹部以外的区域的细胞外基质；以及细胞外基质除去机构，该机构被构成为从所述培养基板除去由所述刮具剥离的细胞外基质，其中培养基板被构成为使细胞经所述细胞外基质附着在所述培养基板上。

4、此外，根据本发明的一个方面，提供细胞培养方法，其包括：通过使细胞附着在布置有多个凹部的培养基板上来培养细胞；通过使刮具在培养基板上在多个凹部以外的区域滑动来剥离附着在培养基板上多个凹部以外的区域的细胞；并从培养基板除去由刮具剥离的细胞。

5、此外，根据本发明的一个方面，提供细胞培养方法，其包括：将细胞外基质施用于布置有多个凹部的培养基板上；在施用细胞外基质后，使刮具在培养基板上在多个凹部以外的区域滑动来剥离附着在培养基板上多个凹部以外的区域的细胞外基质；从所述培养基板除去由所述刮具剥离的细胞外基质；并将细胞接种在所述除去后的培养基板上，并培养细胞。

6、本发明的进一步特征将从以下示例性实施方式的描述中参照附图变得清楚。

7、【附图简要说明】

8、图1a是示出根据本发明的细胞培养系统示例的整体构成轮廓的透视图。

9、图1b是示出培养基板轮廓的俯视图。

10、图1c是示出凹部形状的截面图。

11、图2a是示出本发明的细胞培养系统的一个示例中，当细胞接种后培养时所呈现的凹部状态的俯视图。

12、图2b是示出细胞接种后培养时所呈现的凹部状态的截面图。

13、图2c是示出在细胞接种和培养时培养基板和刮具所展示的状态的俯视图。

14、图2d是示出当由刮具剥离附着在凹部以外的区域的细胞时，所展示的凹部和刮具状态的截面图。

15、图2e是示出在剥离这些细胞时培养基板和刮具所展示的状态的俯视图。

16、图2f是示出由刮具剥离附着在凹部以外的区域的细胞后所呈现的凹部状态的俯视图。

17、图2g是示出这些细胞剥离后所呈现的凹部状态的截面图。

18、图2h是示出在细胞剥离后培养基板和刮具的状态的俯视图。

19、图3a是示出凹部形状的示例的截面图。

20、图3b是示出具有斜面的凹部的截面图。

21、图3c是示出具有凹曲面的凹部的截面图。

22、图3d是示出除凹部外的每个区域都具有凸曲面的培养基板的截面图。

23、图3e是示出将刮具压在除凹部外的每个区域都具有凸曲面的培养基板上的状态的截面图。

24、图3f是示出凹部的透视图，每个凹部的形状像一个在一个方向上延申的沟。

25、图3g是示出培养基板的透视图，包括每个凹部，每个凹部形状像一个在一个方向上延申的沟，每个区域除凹部外都具有凸曲面。

26、图4a是示出根据第一实施方式的细胞培养系统的整体构成的示意图。

27、图4b是示出具有凹部的培养基板的俯视图。

28、图4c是凹部的截面图。

29、图5是示出在第一实施方式中在刮具操作期间细胞培养系统的样式的示意图。

30、图6是示出在第一实施方式中细胞剥离机构操作期间细胞培养系统的样式的示意图。

31、图7a是示出第一实施方式中培养基板和凹部状态的俯视图，并示出了在细胞培养后形成大于凹部的集落的情况下，将细胞由刮具剥离后呈现的培养基板的状态。

32、图7b是示出在细胞培养后形成不覆盖整个凹部区域的集落的情况下，在将细胞由刮具剥离后所呈现的培养基板状态的俯视图。

33、图7c是示出在细胞培养后已形成了大于凹部的集落时，将细胞由刮具剥离后呈现的凹部状态的俯视图。

34、图7d是示出在细胞培养后形成大于凹部的集落时，在将细胞由刮具剥离后呈现的凹部状态的截面图。

35、图7e是示出在细胞培养后已形成了不覆盖整个凹部区域的集落时，将细胞由刮具剥离后所呈现的凹部状态的俯视图。

36、图7f是示出在细胞培养后已形成了不覆盖整个凹部区域的集落时，将细胞由刮具剥离后所呈现的凹部状态的截面图。

37、图8a是示出细胞剥离机构如何移动到培养基板上方的俯视图。

38、图8b是示出附着在凹部处的细胞如何通过细胞剥离机构剥离的俯视图。

39、图9是示出根据第二实施方式的细胞培养系统的整体构成的示意图。

40、图10是根据第三实施方式的细胞培养系统的系统流程图。

41、图11是示出根据本发明的细胞培养系统的构成例的框图。

42、图12是示出根据本发明的细胞培养系统的构成例的框图。

43、图13是示出根据本发明的信息处理部的硬件构成例的框图。

44、图14是示出本发明中刮具在垂直于培养基板上刮具滑动轴的方向上的宽度和本发明中垂直于培养基板上刮具滑动轴方向的凹部宽度的俯视图。

技术特征：

1.细胞培养系统，其包括：

2.细胞培养系统，其包括：

3.根据权利要求1或2所述的细胞培养系统，其还包括摄像部，其构成为允许观察细胞的状态。

4.根据权利要求3所述的细胞培养系统，其还包括信息处理部，所述信息处理部包括：

5.根据权利要求1所述的细胞培养系统，其还包括摄像部，其构成为允许观察附着在多个凹部以外的区域的细胞的剥离残留物。

6.根据权利要求5所述的细胞培养系统，其还包括信息处理部，用于在识别剥离残留物时，用刮具除去剥离残留物。

7.根据权利要求1或2所述的细胞培养系统，其中所述刮具在垂直于所述培养基板上刮具的滑动轴方向上的宽度大于所述多个凹部中每个凹部在垂直于所述培养基板上刮具的滑动轴方向上的宽度。

8.根据权利要求1或2所述的细胞培养系统，其中所述多个凹部各具有倾斜表面。

9.根据权利要求1或2所述的细胞培养系统，其中所述多个凹部各具有凹曲面。

10.根据权利要求1或2所述的细胞培养系统，其中所述多个凹部以外的区域具有凸曲面。

11.根据权利要求1或2所述的细胞培养系统，其还包括：

12.根据权利要求1或2所述的细胞培养系统，其还包括用于培养细胞的细胞培养机构。

13.根据权利要求1或2所述的细胞培养系统，其中所述细胞包括贴壁细胞。

14.细胞培养方法，其包括：

15.细胞培养方法，其包括：

技术总结
本发明提供细胞培养系统和细胞培养方法，便于估计培养后的细胞数量。细胞培养系统包括：培养基板，其上布置有多个凹部并导致细胞附着在其上；刮具，用于通过在培养基板上滑动并与培养基板上的凹部以外的区域接触来剥离附着在培养基板上凹部以外的区域的细胞；以及细胞除去机构，用于从所述培养基板除去由所述刮具剥离的细胞。

技术研发人员：海老泽尚史,山本阳治,原田伊知郎
受保护的技术使用者：佳能株式会社
技术研发日：
技术公布日：2024/12/5