抗TROP2蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用与流程

本发明涉及生物医学工程领域，特别涉及一种抗trop2蛋白单克隆抗体及其制备方法和应用。

背景技术：

1、trop2是共刺激分子b7家族的成员，b7-cd28家族的免疫检查点分子之一。在t细胞介导的免疫反应中起到重要作用。trop2蛋白在正常组织和细胞中不表达或极低表达，但在多种恶性肿瘤中异常表达，并与肿瘤的进展及患者预后密切相关。trop2蛋白分子是1个编码316个氨基酸的i型跨膜蛋白，包含7个外显子和6个内含子。此外，trop2蛋白还存在2种主要剪切体，胞外段由ig-v-igc组成的trop2a(2ig-trop2)和胞外段由ig-v-igc-ig-v-igc组成的b7-h3b(4ig-trop2)，人类以4ig-trop2表达为主。

2、trop2在肿瘤免疫中的作用存在争议，一方面它可以发挥共刺激作用，刺激cd4和cd8t细胞的增殖以及ifn-γ、il-8及tnf-α等细胞因子的分泌，提高机体对肿瘤的免疫反应。另一方面它又能抑制cd4+t细胞得活化以及ifn-γ和il-4等细胞因子的产生，发挥共抑制作用。

3、研究已经证实trop2的表达水平与恶性肿瘤的发生、增殖、转移和侵袭、代谢及肿瘤血管生成密切相关。已有免疫组织化学结果显示b7-h3在肝癌、大肠癌、子宫内膜癌、乳腺癌、胆管癌、结直肠癌等多种癌症组织中高表达，并与肿瘤的浸润程度、远处转移和分化程度显著相关。

技术实现思路

1、发明人提供了一种抗trop2蛋白单克隆抗体，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为seq id no.1所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为seq id no.2所示的氨基酸序列。

2、进一步的，所述单克隆抗体特异性识别trop2蛋白。

3、进一步的，所述单克隆抗体为兔单克隆抗体。

4、进一步的，所述兔单克隆抗体的克隆号为t1815162。

5、发明人还提供了一种抗trop2蛋白单克隆抗体的制备方法，用于免疫兔的抗原为重组蛋白，所述重组蛋白由大肠杆菌重组表达。

6、进一步的，所述重组蛋白包含trop2蛋白片段及his蛋白标签。

7、进一步的，所述trop2蛋白片段为seq id no.3所示的氨基酸序列。

8、进一步的，重组过程中选用的质粒载体为pcmv3。

9、发明人还提供了一种trop2蛋白免疫检测试剂，所述免疫检测试剂含有上述抗trop2蛋白的单克隆抗体为其有效成分。

10、区别于现有技术，本发明所产生的有益技术效果为：上述技术方案提供一种抗trop2蛋白兔单克隆抗体，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为seq id no.1所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为seq id no.2所示的氨基酸序列。该抗体具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达trop2蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。

技术特征：

1.一种抗trop2蛋白单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为seq id no.1所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为seqid no.2所示的氨基酸序列。

2.根据权利要求1所述的单克隆抗体，其特征在于，所述单克隆抗体为兔单克隆抗体，克隆号为t1815162。

3.一种抗trop2蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，用于免疫兔的抗原为重组蛋白，所述重组蛋白由大肠杆菌重组表达。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述重组蛋白包含trop2蛋白片段及his蛋白标签。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述trop2蛋白片段为seq id no.3所示的氨基酸序列。

6.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，重组过程中选用的质粒载体为pcmv3。

7.一种trop2蛋白免疫检测试剂，其特征在于，所述免疫检测试剂含有权利要求1所述抗trop2蛋白单克隆抗体为其有效成分。

8.根据权利要求7所述的免疫检测试剂，其特征在于，所述免疫检测包括免疫组织化学法，免疫印迹法和酶联免疫法。

技术总结
本发明涉及一种可以识别人TROP2抗原的单克隆抗体，其制备方法以及其在免疫检测中的用途。本发明提供一种抗TROP2蛋白兔单克隆抗体，所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.1所示的氨基酸序列；所述单克隆抗体轻链可变区的氨基酸序列为SEQ ID NO.2所示的氨基酸序列。该抗体具有高特异性、敏感性，可以特异性识别表达TROP2蛋白的细胞，适用于免疫学检测，特别是免疫组化检测。

技术研发人员：吴楠楠,杨清海,陈惠玲,齐慧慧,陈泳
受保护的技术使用者：福州迈新生物技术开发有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/12/5