本发明属于植物育种,具体涉及gmmyb29蛋白在抗大豆胞囊线虫病中的应用。
背景技术:
1、大豆(glycine max(l.)merr.)在中国种植历史悠久,是我国重要油料作物之一,优质的蛋白和食用油的主要来源。大豆胞囊线虫病(soybean cyst nematode,简称scn)是严重的土传性病害,一般情况下可造成大豆减产30-50%左右,严重时可造成颗粒无收。scn具有分布范围广、危害严重、胞囊在土壤中存活时间长,生理小种广泛等特点成为一种极为难防的土传性疾病。在在漫长的的育种实践中,少数抗scn种质资源的应用,造成抗病品种资源遗传基础狭窄的局限性,这是导致大豆产量低、不稳定的主要原因之一。目前主流的防治措施主要包括:合理轮作、化学药剂、培育抗scn种质。合理轮作虽然可以有效的控制大豆胞囊线虫的发展,但是伴随生理小种的分化,无法从根本上完全消除大豆胞囊线虫病。化学药剂可以有效的防治scn的发展,但是对土壤环境的危害又严重又不可控。抗scn大豆的培育是一种极为有效的方式,但是传统的培育抗scn种质周期较长,利用分子生物学和基因工程等手段对大豆种质改良变得迫在眉睫,因此挖掘可用于改良导大豆对scn抗性的基因资源至关重要。
技术实现思路
1、本发明的目的是为了提供一种抗抗大豆胞囊线虫病的育种方法。
2、本发明提供一种gmmyb29蛋白在提高大豆抗大豆胞囊线虫病中的应用,所述gmmyb29蛋白的序列如seq id no.8所示。
3、本发明提供一种gmmyb29基因在提高大豆抗大豆胞囊线虫病中的应用,所述gmmyb29基因的序列如seq id no.7所示。
4、本发明提供一种含有gmmyb29基因的重组载体在提高大豆抗大豆胞囊线虫病中的应用,所述gmmyb29基因的序列如seq id no.7所示。
5、进一步地限定,所述重组载体的出发载体为pcambia3300。
6、本发明提供一种含有gmmyb29基因的重组微生物细胞在提高大豆抗大豆胞囊线虫病中的应用,所述gmmyb29基因的序列如seq id no.7所示。
7、进一步地限定,所述重组微生物细胞为原核微生物细胞或真核微生物细胞。
8、本发明提供一种制备抗大豆胞囊线虫病的植株的方法,所述方法的具体步骤如下:
9、步骤1:将seq id no.7所示的基因与载体pcambia3300连接,获得重组载体;
10、步骤2:将步骤1所述的重组载体转化至农杆菌中,获得重组农杆菌;
11、步骤3:将步骤2所述的重组农杆菌转入大豆中获得转基因大豆植株,鉴定后获得阳性的转基因大豆植株。
12、进一步地限定,步骤1中扩增seq id no.7所示基因的引物如seq id no.1和seqid no.2所示。
13、本发明提供一种提高大豆对大豆胞囊线虫病抗性的方法,利用大豆胞囊线虫感染过表达gmmyb29基因的大豆植株。
14、本发明提供一种含有过表达gmmyb29基因的大豆植株在抗大豆胞囊线虫病中的育种中的应用。
15、有益效果:pcambia3300-gmmyb29转基因阳性根雌虫数目平均值为2.52个/cm,低于对照组,对照组根系雌虫数目平均值为3.76个/cm,转基因阳性根部与阴性对照根部存在着极显著差异,证实gmmyb29基因对大豆胞囊线虫病抗性提高作用明显。
1.gmmyb29蛋白在提高大豆抗大豆胞囊线虫病中的应用,其特征在于,所述gmmyb29蛋白的序列如seq id no.8所示。
2.gmmyb29基因在提高大豆抗大豆胞囊线虫病中的应用,其特征在于,所述gmmyb29基因的序列如seq id no.7所示。
3.含有gmmyb29基因的重组载体在提高大豆抗大豆胞囊线虫病中的应用,其特征在于,所述gmmyb29基因的序列如seq id no.7所示。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,所述重组载体的出发载体为pcambia3300。
5.含有gmmyb29基因的重组微生物细胞在提高大豆抗大豆胞囊线虫病中的应用,其特征在于,所述gmmyb29基因的序列如seq id no.7所示。
6.根据权利要求5所述的应用,其特征在于,所述重组微生物细胞为原核微生物细胞或真核微生物细胞。
7.一种制备抗大豆胞囊线虫病的植株的方法,其特征在于,所述方法的具体步骤如下:
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,步骤1中扩增seq id no.7所示基因的引物如seq id no.1和seq id no.2所示。
9.一种提高大豆对大豆胞囊线虫病抗性的方法,其特征在于,利用大豆胞囊线虫感染过表达gmmyb29基因的大豆植株。
10.含有过表达gmmyb29基因的大豆植株在抗大豆胞囊线虫病中的育种中的应用。