细胞分选方法与流程

本申请涉及细胞分选领域，特别是涉及一种细胞分选方法。

背景技术：

1、随着生物医疗领域的发展，出现了细胞分选技术，根据细胞所具有的特性将某种特定的细胞亚群从混合的细胞样品中分离处理，以实现对特定细胞的功能分析，特别是单细胞的分选提取。

2、生物培养芯片是充分利用显微技术或纳米技术，在芯片上完成对细胞的捕获、固定、培养等精准控制，并通过微型化的化学分析方法，实现细胞样品的高通量、多参数、原位信号检测和细胞组分的理化分析等研究目的，可以实现单细胞的固定和培养。

3、相关技术中，单细胞分选方法主要有口吸管技术、极限稀释技术、荧光流式细胞分选技术等。然而通过口吸管技术、极限稀释法实现对生物培养芯片的单细胞分选，存在分选通量低、劳动强度高、分选效率低的问题，而荧光流式细胞分选技术又难以与生物培养芯片相结合。

技术实现思路

1、基于此，有必要针对上述技术问题，提供一种细胞分选方法，以通过生物培养芯片实现高通量的细胞分选，提高细胞分选效率。

2、本申请提供了一种细胞分选方法，细胞分选方法包括：添加细胞的步骤，将待分选细胞添加至生物培养芯片，使待分选细胞在生物培养芯片中形成阵列；添加筛选培养基的步骤，将筛选培养基中的物质与阵列完成的待分选细胞的分泌物质特异性结合；放置芯片的步骤，将生物培养芯片放置于细胞分选装置；以及分选的步骤，通过细胞分选装置分选出符合预设要求的细胞。

3、将待分选细胞在生物培养芯片中进行阵列，可以实现单细胞分布。通过筛选培养基培养得到符合预设要求的细胞，再将生物培养芯片通过细胞分选装置进行细胞分选，可有效分选出符合预设要求的单细胞。该细胞分选方法可以实现高通量的单细胞分选，提高细胞分选效率。

4、在其中一个实施例中，分选的步骤进一步包括：获取图像的步骤，获取待分选细胞的图像信息；筛选细胞的步骤，根据待分选细胞的图像信息选出符合预设要求的细胞；以及吸取细胞的步骤，吸取生物培养芯片中的符合预设要求的细胞。通过对待分析细胞的图像信息进行获取筛选，选出符合预设要求的细胞，实现细胞的分选。

5、在其中一个实施例中，获取图像的步骤进一步包括获取待分选细胞的明场图像信息和荧光图像信息。通过获取细胞的明场图像信息以及荧光图像信息以选出符合预设要求的细胞。

6、在其中一个实施例中，在吸取细胞的步骤之后还包括释放细胞的步骤，释放生物培养芯片中的符合预设要求的细胞至预设区域。通过释放细胞实现符合预设要求的细胞的回收培养。

7、在其中一个实施例中，细胞分选方法还包括第一次分离步骤，第一次分离步骤在添加细胞的步骤之后和添加筛选培养基的步骤之前，第一次分离步骤将未形成阵列的细胞分离。第一次分离可分离出未阵列的细胞，一方面未阵列的细胞回收够可继续作为待分选细胞进行阵列分析，另一方面可以保证阵列细胞的阵列情况，便于获取待分选的细胞的图像信息，选出符合预设要求的细胞。

8、在其中一个实施例中，细胞分选方法还包括第二次分离步骤，第一次分离步骤在添加筛选培养基的步骤之后，第二次分离步骤将悬浮细胞分离。第二次分离避免悬浮细胞对待分选细胞的干扰，改善阵列细胞的利用率，提高细胞分选效率。

9、在其中一个实施例中，添加细胞的步骤之前还包括放置芯片于芯片容纳件的步骤。该步骤实现生物培养芯片应用于细胞分选装置。

10、在其中一个实施例中，生物培养芯片包括多个离散分布的容纳腔，容纳腔设置为阵列。容纳腔的设置便于形成单细胞阵列，以实现单细胞的分选。

11、在其中一个实施例中，待分选细胞数量和生物培养芯片的通量之间的比值在5:1至10:1之间。该比值可保证较优的单细胞阵列效率。

12、在其中一个实施例中，添加筛选培养基的步骤之前还包括制备筛选培养基的步骤，筛选培养基包括预设种类的荧光染料、抗原和细胞培养基。通过筛选培养基的制备，以实现后续对细胞的特异性培养，选出符合预设要求的细胞。

技术特征：

1.一种细胞分选方法，其特征在于，所述细胞分选方法包括：

2.根据权利要求1所述的细胞分选方法，其特征在于，所述分选的步骤进一步包括：

3.根据权利要求2所述的细胞分选方法，其特征在于，所述获取图像的步骤进一步包括获取所述待分选细胞的明场图像信息和荧光图像信息。

4.根据权利要求2或3所述的细胞分选方法，其特征在于，在所述吸取细胞的步骤之后还包括释放细胞的步骤，释放所述生物培养芯片中的所述符合预设要求的细胞至预设区域。

5.根据权利要求1所述的细胞分选方法，其特征在于，所述细胞分选方法还包括第一次分离步骤，所述第一次分离步骤在所述添加细胞的步骤之后和所述添加筛选培养基的步骤之前，所述第一次分离步骤将未形成阵列的细胞分离。

6.根据权利要求5所述的细胞分选方法，其特征在于，所述细胞分选方法还包括第二次分离步骤，所述第一次分离步骤在所述添加筛选培养基的步骤之后，所述第二次分离步骤将悬浮细胞分离。

7.根据权利要求1所述的细胞分选方法，其特征在于，所述添加细胞的步骤之前还包括放置芯片于芯片容纳件的步骤。

8.根据权利要求1所述的细胞分选方法，其特征在于，所述生物培养芯片包括多个离散分布的容纳腔，所述容纳腔设置为所述阵列。

9.根据权利要求1所述的细胞分选方法，其特征在于，所述待分选细胞数量和所述生物培养芯片的通量之间的比值在5:1至10:1之间。

10.根据权利要求1所述的细胞分选方法，其特征在于，所述添加筛选培养基的步骤之前还包括制备筛选培养基的步骤，所述筛选培养基包括标记物和细胞培养基。

技术总结
本申请涉及一种细胞分选方法，细胞分选方法包括添加细胞的步骤，将待分选细胞添加至生物培养芯片，使待分选细胞在生物培养芯片中形成阵列；添加筛选培养基的步骤，将筛选培养基中的物质与阵列完成的待分选细胞的分泌物质特异性结合；放置芯片的步骤，将生物培养芯片放置于细胞分选装置；以及分选的步骤，通过细胞分选装置分选出符合预设要求的细胞。该细胞分选方法可实现高通量的单细胞分选，提高细胞分选效率。

技术研发人员：乔勇
受保护的技术使用者：南京凌芯生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/12/5