抗RAGE抗体及其应用的制作方法

本申请属于生物工程领域，具体涉及一种抗rage抗体，一种包含所述抗rage抗体的偶联物、双特异性、多特异性抗体、免疫细胞、融合蛋白及其应用。

背景技术：

1、晚期糖基化终产物特异性受体（receptor for advanced glycationendproducts, rage, 或称为ager），是免疫球蛋白超家族的多配体细胞表面成员。rage由胞外结构域、单跨膜结构域和胞质尾部组成。受体的胞外结构域由一个v型免疫球蛋白结构域和两个c型免疫球蛋白结构域组成。rage由多种细胞类型表达，如内皮细胞和平滑肌细胞、巨噬细胞和淋巴细胞，在许多不同的组织中，包括肺、心、肾、骨骼肌和脑。rage参与许多重要的病理学反应，包括阿尔茨海默病、糖尿病、炎症和癌症。rage刺激癌症生长、生存和转移。此外，rage表达与胃癌侵袭和转移密切相关。而且，有报道表明阻断rage可抑制胃癌细胞侵袭。有报道ser82通过细胞分裂素(丝裂原)活化蛋白激酶(mapk)和核因子κb(nf-κb)增强配体亲和力，上调受体信号。rage与晚期糖基化终产物(ages)、s100蛋白等相作用。配体与受体rage的作用激活重要细胞通路，包括mapk，cdc42/rac和nf-κb信号通路。

2、目前已报道的绝大多数抗rage抗体分子仅对单一种属来源的rage具有较高的亲和力，但是抗原种属单一限制了抗体的通用性。

技术实现思路

1、针对现有技术中的上述问题，本申请提供了一种抗rage抗体，其可靶向人、鼠、猴不同种属的rage抗原靶点，无论是科学研究还是临床应用都具有很高的应用价值。

2、本申请的具体技术方案如下：

3、1. 一种抗rage抗体，其中，所述抗体包含三个重链互补决定区和三个轻链互补决定区，所述三个重链互补决定区为cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3，所述三个轻链互补决定区为cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3，其中：

4、所述cdr-h1包含的氨基酸序列如seq id no：1所示，seq id no：1为ssyais；

5、所述cdr-h2包含的氨基酸序列如seq id no：2所示，seq id no：2为riipilgian；

6、所述cdr-h3包含的氨基酸序列如seq id no：3所示，seq id no：3为qvgaidy；

7、所述cdr-l1包含的氨基酸序列如seq id no：4所示，seq id no：4为qsistyvs；

8、所述cdr-l2包含的氨基酸序列如seq id no：5所示，seq id no：5为iyyasilks；以及

9、所述cdr-l3包含的氨基酸序列如seq id no：6所示，seq id no：6为qsysfplt。

10、2. 根据项1所述的抗rage抗体，其包含人类通用框架区。

11、3. 根据项1所述的抗rage抗体，其中，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，其中：

12、所述重链可变区包含的氨基酸序列如seq id no：7所示，或为与seq id no：7具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%或99%同一性的氨基酸序列，其中seq id no：7为qvqlvqswaevkkpgssvkvsckasggtfssyaiswvrqapgqglewmgriipilgianyaqkfqgrvtitadkststaymelsslrsedtavyycasqvgaidywgqgtpvtvss；

13、所述轻链可变区包含的氨基酸序列如seq id no：8所示，或为与seq id no：8具有至少90%、91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%同一性的氨基酸序列，其中，seq id no：8为niqltqspsslsaslgdrvtitcrtsqsistyvswyqqrsgeapnlliyyasilksgvpsrfsgsgsgtdftltisslqpedfatyycqqsysfpltfgggtkveik。

14、4. 根据项1~3中任一项所述的抗rage抗体，其为人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。

15、5. 根据项1~3中任一项所述的抗rage抗体，其为igg全长抗体。

16、6. 根据项1~3中任一项所述的抗rage抗体，其为igg1全长抗体。

17、7. 根据项1~3中任一项所述的抗rage抗体，其为选自以下任意一种的抗原结合片段：fv、fab、f(ab')2、fab'、fd、dsfv、scfv、sc(fv)2、dab、分离的互补决定区、结构域特异性抗体、单结构域抗体、结构域缺失抗体、cdr嫁接抗体、双抗体、三抗体、四抗体和微抗体。

18、8. 根据项1~3中任一项所述的抗rage抗体，其与人、猴和鼠来源的rage抗原结合。

19、9. 包含根据项1~8中任一项所述的抗rage抗体的偶联物。

20、10. 根据项9所述的偶联物，其包括与所述抗rage抗体偶联的治疗剂。

21、11. 根据项10所述的偶联物，所述治疗剂选自细胞毒性剂、激素制剂、靶向小分子制剂、蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂、血管生成抑制剂、细胞增殖抑制剂、促细胞凋亡剂、细胞因子、共刺激分子的激活剂中的一种或多种。

22、12. 包含根据项1~8中任一项所述的抗rage抗体的双特异性或多特异性抗体。

23、13. 包含项1~8中任一项所述的抗rage抗体或其编码核酸的免疫细胞。

24、14. 根据项13所述的免疫细胞，其为nk细胞、t细胞或树突细胞。

25、15. 包含项1~8中任一项所述的抗rage抗体和一种或多种多肽或蛋白的融合蛋白。

26、16. 一种编码项1~8中任一项所述的抗rage抗体的核酸分子。

27、17. 一种表达载体，其包含项16所述的核酸分子。

28、18. 一种细胞，其包含项16所述的核酸分子或项17所述的表达载体。

29、19. 项1~8中任一项所述的抗rage抗体、项9~11中任一项所述的偶联物、项12所述的双特异性或多特异性抗体、项13或14所述的免疫细胞或项15所述的融合蛋白在制备诊断、治疗和/或预防疾病的药物中的用途。

30、发明的效果

31、本申请的抗rage抗体是人、鼠、猴交叉分子，其可靶向人、鼠、猴不同种属的rage抗原靶点，同时抗rage抗体对rage抗原蛋白和细胞表面rage抗原具有高效结合活性，无论是科学研究还是临床应用都具有很高的应用价值。

技术特征：

1.一种抗rage抗体，其中，所述抗体包含三个重链互补决定区和三个轻链互补决定区，所述三个重链互补决定区为cdr-h1、cdr-h2和cdr-h3，所述三个轻链互补决定区为cdr-l1、cdr-l2和cdr-l3，其中：

2.根据权利要求1所述的抗rage抗体，其包含人类通用框架区。

3.根据权利要求1所述的抗rage抗体，其中，所述抗体包含重链可变区和轻链可变区，其中：

4.根据权利要求1~3中任一项所述的抗rage抗体，其为人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。

5.根据权利要求1~3中任一项所述的抗rage抗体，其为igg全长抗体。

6.根据权利要求1~3中任一项所述的抗rage抗体，其为igg1全长抗体。

7.根据权利要求1~3中任一项所述的抗rage抗体，其为选自以下任意一种的抗原结合片段：fv、fab、f(ab')2、fab'、fd、dsfv、scfv、sc(fv)2、dab、分离的互补决定区、结构域特异性抗体、单结构域抗体、结构域缺失抗体、cdr嫁接抗体、双抗体、三抗体、四抗体和微抗体。

8.根据权利要求1~3中任一项所述的抗rage抗体，其与人、猴和鼠来源的rage抗原结合。

9.包含根据权利要求1~8中任一项所述的抗rage抗体的偶联物。

10.根据权利要求9所述的偶联物，其包括与所述抗rage抗体偶联的治疗剂。

11.根据权利要求10所述的偶联物，所述治疗剂选自细胞毒性剂、激素制剂、靶向小分子制剂、蛋白酶体抑制剂、免疫调节剂、血管生成抑制剂、细胞增殖抑制剂、促细胞凋亡剂、细胞因子、共刺激分子的激活剂中的一种或多种。

12.包含根据权利要求1~8中任一项所述的抗rage抗体的双特异性或多特异性抗体。

13.包含权利要求1~8中任一项所述的抗rage抗体或其编码核酸的免疫细胞。

14.根据权利要求13所述的免疫细胞，其为nk细胞、t细胞或树突细胞。

15.包含权利要求1~8中任一项所述的抗rage抗体和一种或多种多肽或蛋白的融合蛋白。

16.一种编码权利要求1~8中任一项所述的抗rage抗体的核酸分子。

17.一种表达载体，其包含权利要求16所述的核酸分子。

18.一种细胞，其包含权利要求16所述的核酸分子或权利要求17所述的表达载体。

19.权利要求1~8中任一项所述的抗rage抗体、权利要求9~11中任一项所述的偶联物、权利要求12所述的双特异性或多特异性抗体、权利要求13或14所述的免疫细胞或权利要求15所述的融合蛋白在制备诊断、治疗和/或预防疾病的药物中的用途。

技术总结
本申请公开了一种抗RAGE抗体，还公开了一种包含所述抗RAGE抗体的偶联物、双特异性、多特异性抗体、免疫细胞、融合蛋白等。本申请的抗RAGE抗体可靶向人、鼠、猴不同种属的RAGE抗原靶点，在科学研究和临床应用方面都具有很高的应用价值。

技术研发人员：李志,赵立波,孔关义,赵航,刘达,张嘉珣,时韦美
受保护的技术使用者：北京恩泽康泰生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/12/5