一种利用乙醇硫酸铵双水相体系萃取葛根素的方法

本发明涉及葛根素萃取领域，特别是涉及一种利用乙醇／硫酸铵双水相体系萃取葛根素的方法。

背景技术：

1、葛根素亦称葛根黄素、葛根黄酮，化学名8-beta-d-葡萄吡喃糖-4',7-二羟基异黄酮，从中药葛根中分离的具有扩冠作用的异黄酮类衍生物，存在于豆科植物葛 puerarialobata（willd.）ohwi，野葛 p.thunbergianabenth，分子式c21h20o9，相对分子质量416.38，呈黄色结晶状，高含量为白色针状结晶粉末，熔点187-189℃，溶于水、甲醇、乙醇、吡啶，易溶于热水，难溶于苯、氯仿、乙醚等，与醋酸镁反应显黄色，与醋酸铅反应呈黄色沉淀。

2、葛根为豆科植物野葛的根，常见中药，具有解肌退热、生津、透疹、升阳止泻等功效。其主要成分为异黄酮类化合物，如葛根素、大豆苷、大豆苷元、三萜类等，有效成分为葛根素，含量高，具有扩张冠脉和脑血管、降低心肌耗氧量、改善心肌收缩功能、促进血液循环等作用，对垂体后叶素引起的急性心肌出血有保护作用。临床上用于冠心病、心绞痛、心肌梗塞、高血压、视网膜动脉静脉阻塞、突发性耳聋等疾病，疗效显著。

3、目前广泛使用的提取葛根素方法有醇提取法和铅盐法，但污染大收率低；正交试验结果提取收率虽然有所提高，但存在一定缺陷，如大量使用有机溶剂破坏药理活性，或者缺少对葛根淀粉的再利用，造成资源浪费与环境污染，经济效益较低。

4、双相萃取特点在于条件温和，保留产物活性，广泛应用于胞内酶的提取等领域。本发明首次利用乙醇∕硫酸铵双水相体系提取葛根素，为葛根的研究、开发与利用提供一定帮助。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是提供一种利用乙醇／硫酸铵双水相体系萃取葛根素的方法。

2、为此，本发明的技术方案如下：

3、一种利用乙醇／硫酸铵双水相体系萃取葛根素的方法，包括以下步骤：

4、1）样品前处理：葛根→清洗→去皮→切块→匀浆→过滤→沉降→重提→浓缩。具体操作要点，20 g葛根洗净、去皮，切块后加入400 ml蒸馏水，400 ml无水乙醇，滤布过滤收集，静置过夜后倾出上清液，倒入圆底烧瓶；沉淀加入适量无水乙醇，过滤收集上清倒入圆底烧瓶，重复2~3次，旋转蒸发器中抽真空蒸发浓缩，得到葛根浓缩液转移至锥形瓶备用。

5、2）萃取组合处理：研究不同乙醇质量分数、硫酸铵质量分数、温度、添加不同种类无机盐等因素条件下浓缩液中葛根素的回收率。

6、葛根素检测利用其为异黄酮类化合物，一定条件下（ph 4）下能与金属离子al3+络合，在340 nm具有最大吸收波长，萃取后的乙醇相中加入alcl3溶液，调ph后反应5 min测定吸光度并计算得率。20 g葛根浓缩液中葛根素回收试验，各因素水平分别为乙醇质量分数（20% ~ 28%），硫酸铵质量分数（17% ~ 21%），温度（25 ~ 65℃），适量辅助盐（氯化钠nacl、磷酸二氢钠nah2po4、氯化钾kcl、硫酸钾k2so4）。

7、优选的是，所述乙醇质量分数为24%。

8、优选的是，所述乙醇：硫酸铵质量分数为24%：18%。

9、优选的是，所述温度为35℃。

10、优选的是，所述辅助盐为氯化钠。

11、本发明具有以下有益效果：

12、本发明的方法采用不同萃取组合提取葛根素，提取效果良好。该组合能保护提取物的活性，连续化操作，并容易、精确地按比例放大，成本低，能够在较少的溶液量和较短的操作时间内获得较高产量的产品。

技术特征：

1.一种利用乙醇／硫酸铵双水相体系萃取葛根素的方法，其特征在于包括以下步骤：

2.葛根素检测利用其为异黄酮类化合物，一定条件下（ph 4）下能与金属离子al3+络合，在340 nm具有最大吸收波长，萃取后的乙醇相中加入alcl3溶液，调ph后反应5 min测定吸光度并计算得率；20 g葛根浓缩液中葛根素回收试验，各因素水平分别为乙醇质量分数（20% ~ 28%），硫酸铵质量分数（17% ~ 21%），温度（25 ~ 65℃），适量辅助盐（氯化钠nacl、磷酸二氢钠nah2po4、氯化钾kcl、硫酸钾k2so4）。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：质量分数为24%的乙醇为萃取最佳组分。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：双水相体系组分中乙醇：硫酸铵质量分数为24%：18%。

5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：温度为35℃时对萃取更有利。

6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：体系中加入nacl对葛根素的萃取更有利。

技术总结
本发明公开了一种利用乙醇／硫酸铵双水相体系萃取葛根素的方法，包括以下步骤：1）样品前处理：葛根→清洗→去皮→切块→匀浆→过滤→沉降→重提→浓缩。2）萃取组合处理：研究不同乙醇质量分数、硫酸铵质量分数、温度、添加不同种类无机盐等因素条件下浓缩液中葛根素的回收率。该方法采用不同双水相组合萃取葛根中葛根素，提取效果良好，能保护提取物的活性同时连续化操作，成本低，能够在较少的溶液量和较短的操作时间内获得较高产量的产品，同时固废物处理回收十分简易。

技术研发人员：罗希帆,吴疆,杨红澎,陈帅君
受保护的技术使用者：天津农学院
技术研发日：
技术公布日：2024/12/5