展筋活血散特征图谱的构建方法及其特征图谱

本发明属于复方中药制剂品控管理，具体涉及展筋活血散特征图谱的构建方法及其特征图谱。

背景技术：

1、展筋活血散(国药准字z61021521)是一种中成药，主要用于治疗跌打损伤及其他慢性组织损伤，如腰肌劳损、关节挫伤、肩周炎、颈椎病和腰椎盘突出等。它的主要功效包括活血化瘀、通络展筋、消肿止痛。展筋活血散这一药物，其独特之处在于其精细的配方，它汇聚了众多中药材的精华，每一味药材都经过精心挑选与配比，以确保其药效能够最大限度地发挥。其成分丰富多样，涵盖了人参、琥珀、没药、乳香、血竭、珍珠粉、当归、三七、人工麝香和人工牛黄等众多中药材。这些药材各自承载着独特的药理作用，相互协同，增强了治疗效果。人参作为传统中药材中的瑰宝，它不仅能够补气养血，增强体力，还能够调和脏腑功能，为身体提供全面的滋养。而琥珀则具有安神定惊、活血化瘀的功效，它能够帮助患者平复心神，减轻焦虑，同时促进血液循环，缓解瘀血症状。乳香和没药是消肿止痛的良药，它们能够迅速缓解患者因跌打损伤或其他原因引起的肿痛症状，减轻患者的痛苦。当归和三七能够起到活血化瘀，舒筋通络的作用，对于治疗跌打损伤、腰肌劳损等慢性组织损伤有着显著的效果。此外，珍珠粉具有镇静安神、清热解毒的作用，而人工麝香和人工牛黄则具有开窍醒神、消肿解毒的功效。这些药材的协同作用，使得展筋活血散在治疗跌打损伤、关节肌肉肿痛等方面有着显著的疗效。

2、综上所述，展筋活血散的精细配方以及药材之间的协同作用，使其在治疗跌打损伤等慢性组织损伤方面有着独特的优势。它不仅能够缓解患者的疼痛症状，还能够促进损伤组织的修复和再生，帮助患者尽快恢复健康。展筋活血散的药理机制主要体现在促进血液循环和消肿止痛上。其成分中的多种药材具有扩张血管、增加局部血液供应的作用，从而缓解疼痛和炎症反应。同时，一些药材还具有抗炎和镇痛作用，能够减轻组织损伤引起的红肿和疼痛症状。

3、目前关于展筋活血散的质量检测方法较少，多数为方中单味药的成分研究，不能反映展筋活血散的整体成分信息。

技术实现思路

1、本发明的目的是为了解决现有技术的不足，提供一种展筋活血散特征图谱的构建方法及其特征图谱，能够同时检测展筋活血散多种成分，该方法可以准确、清晰、客观的评价展筋活血散的质量，对于控制展筋活血散的质量以及保证临床疗效具有重要作用和价值。

2、本发明通过以下技术方案实现：

3、展筋活血散特征图谱的构建方法，包括以下步骤：

4、s1、取展筋活血散内容物，加入甲醇，超声提取，得到供试品溶液；

5、s2、取人参皂苷rg1、去氢木香内酯、紫檀芪、异槲皮苷、龙血素a、土木香内酯、三七皂苷r1、金丝桃苷、芦丁、白藜芦醇、11-羰基-β-乙酰乳香酸，溶于甲醇，得单一对照品溶液；

6、s3、将s1中供试品溶液和s2中对照品溶液，分别注入高效液相色谱仪进行色谱分析，记录供试品溶液和对照品溶液的色谱图；

7、s4、将供试品溶液进行高分辨质谱分析，得到总离子流图，将总离子流图导入xcalibur软件，根据供试品溶液的色谱图出峰情况进行数据分析，得各化学成分的质谱结果图；

8、s5、根据供试品溶液的色谱图及单一对照品溶液的色谱图，并结合总离子流图以及化学成分的质谱图确定供试品溶液的色谱图中各峰的化学成分，得到特征图谱。

9、优选的，超声提取时间为30min-1h。

10、优选的，s3中，液相色谱条件为：色谱柱为shim-pack vp-ods色谱柱；检测器的检测波长为210nm。

11、优选的，s3中，液相色谱条件为：流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液。

12、优选的，s3中，液相色谱条件为：梯度洗脱，洗脱程序如下表所示：

13、

14、优选的，还包括：将s3中获得的不同批次展筋活血散的供试品溶液的色谱图导入中药色谱特征图谱相似度评价系统并进行相似度分析，确认结果的可靠性。

15、进一步的，将s3中获得的不同批次展筋活血散的供试品溶液的色谱图导入中药色谱特征图谱相似度评价系统并进行相似度分析，确认结果的可靠性，具体为：将s3中获得的不同批次展筋活血散的供试品溶液和对照品溶液的色谱图导入中药色谱特征图谱相似度评价系统；选择不同批次展筋活血散的供试品溶液的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰，用平均值计算法生成展筋活血散的对照图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；经过数据导入、多点矫正和数据匹配，进行相似度分析；获得不同批次展筋活血散的供试品溶液的色谱图与共有峰模式之间的相似度结果表并导出；根据相似度结果表及展筋活血散供试品溶液的色谱图，确认结果的可靠性。

16、优选的，s4中，高分辨质谱检测条件为：电喷雾电离，喷雾电压3500v，鞘气流速40arb，辅助气流速10arb，毛细管温度300℃，辅助气温度300℃，扫描模式为全扫描模式，质荷比扫描范围m/z为100-1300。

17、优选的，s5中，根据s3中获得的供试品溶液的色谱图及单一对照品溶液的色谱图，并结合由高分辨质谱得到的总离子流图以及化学成分的质谱图，以白藜芦醇为参照峰，指认出色谱图中9号峰为芦丁、10号峰为金丝桃苷、11号峰为异槲皮苷、12号峰为三七皂苷r1、16号峰为人参皂苷rg1、31号峰为龙血素a、34号峰为紫檀芪、37号峰为去氢木香内酯、39号峰为土木香内酯，53号峰为11-羰基-β-乙酰乳香酸，得到展筋活血散的特征图谱。

18、本发明还提供采用如上所述的方法构建得到的展筋活血散特征图谱。

19、与现有技术相比，本发明具有如下的有益效果：

20、本发明采用高效液相色谱(hplc)与质谱联用对展筋活血散进行检测，通过对色谱条件进行系统化合理控制，能够同时认定11个共有峰，构成了展筋活血散特征图谱的全貌，并达到控制展筋活血散中原药材目的。本发明引入人参、琥珀、没药、乳香、血竭、珍珠粉、当归、三七、人工麝香和人工牛黄对照药材的特征图谱进行研究，针对对照药材单方与展筋活血散共有的成分进行研究，并作为特征图谱峰确定的依据。采用高效液相色谱和相关对照品指认了11个特征成分，可用于表征血竭、三七、人参、没药和乳香药味，分别为白藜芦醇(17号峰)、龙血素a(31号峰)、紫檀芪(34号峰)来源于血竭；芦丁(9号峰)、金丝桃苷(10号峰)、异槲皮苷(11号峰)、三七皂苷r1(12号峰)来源于三七；人参皂苷rg1(16号峰)来源于人参；去氢木香内酯(37号峰)、土木香内酯(39号峰)来源于没药；11-羰基-β-乙酰乳香酸(53号峰)来源于乳香。本发明构建的特征图谱及方法，精密度高，重现性好，准确可靠，可以快速、全面现对展筋活血散多个特征成分的质量监控，既提升了人参、琥珀、没药、乳香、血竭、珍珠粉、当归、三七、人工麝香和人工牛黄药材的质量控制水平，又提升展筋活血散内在质量；保持了人参、琥珀、没药、乳香、血竭、珍珠粉、当归、三七、人工麝香和人工牛黄药材与展筋活血散质量的一致性，为临床提供符合展筋活血散要求的原料，为展筋活血散用药安全提供了保障。本发明用于构建特征图谱的方法简单易行，重现性好，准确可靠，在同一色谱条件下一次性最少确认11个成分，节约时间，节省检验成本，提高检测效率。

技术特征：

1.展筋活血散特征图谱的构建方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的展筋活血散特征图谱的构建方法，其特征在于，超声提取时间为30min-1h。

3.根据权利要求1所述的展筋活血散特征图谱的构建方法，其特征在于，s3中，液相色谱条件为：色谱柱为shim-pack vp-ods色谱柱；检测器的检测波长为210nm。

4.根据权利要求1所述的展筋活血散特征图谱的构建方法，其特征在于，s3中，液相色谱条件为：流动相为乙腈-0.1％磷酸水溶液。

5.根据权利要求1所述的展筋活血散特征图谱的构建方法，其特征在于，s3中，液相色谱条件为：梯度洗脱，洗脱程序如下表所示：

6.根据权利要求1所述的展筋活血散特征图谱的构建方法，其特征在于，还包括：将s3中获得的不同批次展筋活血散的供试品溶液的色谱图导入中药色谱特征图谱相似度评价系统并进行相似度分析，确认结果的可靠性。

7.根据权利要求5所述的展筋活血散特征图谱的构建方法，其特征在于，将s3中获得的不同批次展筋活血散的供试品溶液的色谱图导入中药色谱特征图谱相似度评价系统并进行相似度分析，确认结果的可靠性，具体为：将s3中获得的不同批次展筋活血散的供试品溶液和对照品溶液的色谱图导入中药色谱特征图谱相似度评价系统；选择不同批次展筋活血散的供试品溶液的色谱图中均存在的色谱峰作为共有峰，用平均值计算法生成展筋活血散的对照图谱，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积；经过数据导入、多点矫正和数据匹配，进行相似度分析；获得不同批次展筋活血散的供试品溶液的色谱图与共有峰模式之间的相似度结果表并导出；根据相似度结果表及展筋活血散供试品溶液的色谱图，确认结果的可靠性。

8.根据权利要求1所述的展筋活血散特征图谱的构建方法，其特征在于，s4中，高分辨质谱检测条件为：电喷雾电离，喷雾电压3500v，鞘气流速40arb，辅助气流速10arb，毛细管温度300℃，辅助气温度300℃，扫描模式为全扫描模式，质荷比扫描范围m/z为100-1300。

9.根据权利要求1所述的展筋活血散特征图谱的构建方法，其特征在于，s5中，根据s3中获得的供试品溶液的色谱图及单一对照品溶液的色谱图，并结合由高分辨质谱得到的总离子流图以及化学成分的质谱图，以白藜芦醇为参照峰，指认出色谱图中9号峰为芦丁、10号峰为金丝桃苷、11号峰为异槲皮苷、12号峰为三七皂苷r1、16号峰为人参皂苷rg1、31号峰为龙血素a、34号峰为紫檀芪、37号峰为去氢木香内酯、39号峰为土木香内酯，53号峰为11-羰基-β-乙酰乳香酸，得到展筋活血散的特征图谱。

10.采用权利要求1-9任一项所述的方法构建得到的展筋活血散特征图谱。

技术总结
本发明提供一种展筋活血散特征图谱的构建方法及其特征图谱，本发明采用高效液相色谱与质谱联用对展筋活血散进行检测，通过对色谱条件进行系统化合理控制，能够同时认定11个共有峰，构成了展筋活血散特征图谱的全。本发明构建的特征图谱及方法，精密度高，重现性好，准确可靠，可以快速、全面现对展筋活血散多个特征成分的质量监控，既提升了人参、琥珀、没药、乳香、血竭、珍珠粉、当归、三七、人工麝香和人工牛黄药材的质量控制水平，又提升展筋活血散内在质量；保持了人参、琥珀、没药、乳香、血竭、珍珠粉、当归、三七、人工麝香和人工牛黄药材与展筋活血散质量的一致性，为临床提供符合展筋活血散要求的原料。

技术研发人员：王永波,韦美艳,张云飞,邓新桃,陈梦欣,田蕾,张佳运,张博鑫,胡津荣,周晶晶,王蒙州,赵倩倩,李菡,李国梁,梁承远
受保护的技术使用者：陕西科技大学
技术研发日：
技术公布日：2024/12/5