一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法及其应用与流程
本发明涉及经济昆虫鉴定，尤其涉及一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法及其应用。
背景技术：
1、虫茶是我国特有的一种林业资源昆虫产品，其加工过程非常特殊，是由特定昆虫取食特定植物原料，在昆虫体内经过特殊的生理生化反应产生的生物发酵物，经筛分、灭菌、干燥等工序制成，粗蛋白、必需氨基酸、粗脂肪、微量元素等营养物质丰富，具清热解毒、祛湿健胃、降血糖血脂、抑菌抗炎等功效，尤其是调节肠道微生态作用显著，早在宋代医学巨著《太平圣惠方》及明代《本草纲目》中多处提到虫茶的药用保健与饮用记载。虫茶因兼具茶叶与中草药的保健与药用功效，被赋予了比普通茶叶更多的保健功能。
2、目前虫茶产业规模逐渐扩大，对产茶昆虫人工标准化饲养繁殖的需求也进一步凸显，不同产茶昆虫在不同虫龄的产茶能力及所产虫茶品质特征、营养成分等都存在差异，因此在生产中如能进行虫龄精确划分，对饲料精准投放、虫茶产品质量控制及虫源健康培育等都具有积极的指导意义。双直巢螟是广西所特有的一种产茶经济昆虫，与其他产茶昆虫相比具有蚕食效率快、制备虫茶得率高及营养丰富等特点，本发明针对双直巢螟构建了一种准确鉴定该经济昆虫及其虫龄的方法，对特色虫茶产业规模化、标准化生产及其健康可持续发展具有重要意义。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法及其应用，解决背景技术中的技术问题。对于待鉴定的昆虫首先通过分子生物学和形态学的方法确定其是否为双直巢螟，然后通过昆虫形态初步确定其发育历期，在此基础上测量幼虫头壳宽度，基于dyar法则进行频数分布分析，绘制幼虫头壳宽度的频数分布图，来确定推测幼虫的分龄，并通过brooks指数和crosby指数和回归分析来验证划分虫龄的准确性。
2、为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
3、一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法，所述方法包括如下步骤：
4、步骤1：通过分子生物学的方法确定待鉴定昆虫为产茶经济昆虫双直巢螟；
5、步骤2：通过形态学初步分析虫龄；
6、步骤3：基于幼虫头壳宽度的dyar分析法精准确定虫龄。
7、进一步地，步骤1的具体过程为：
8、用biospin组织基因组dna提取试剂盒提取待检测昆虫的总dna，使用coi基因通用引物进行pcr扩增，将产物进行测序，获得测序结果后，在ncbi网站进行在线比对，根据遗传基因的相似度，确定待测昆虫的物种为产茶经济昆虫双直巢螟。
9、进一步地，步骤2的具体过程为：
10、使用显微镜、分析天平和测量尺观察昆虫形态特征并测量体重、体长和头壳宽度，按照以下标准进行虫种确认和虫龄初步鉴定：1龄幼虫，虫体乳白色，幼虫体表刚毛发达，头壳呈浅黄色，每头体重0.00005-0.00015g，体长为2.30-2.36mm，头壳宽度为0.3317-0.3319mm，2龄幼虫每头体重为0.0012-0.0016g，体长为3.64-3.70mm，头壳宽度为0.4982-0.4988mm，3龄幼虫每头体重为0.002-0.004g，第1第2腹节颜色变深褐色，其他腹节颜色变浅黄色，体长约5.62-5.66mm，头壳宽度为0.6878-0.6882mm，4龄幼虫每头体为0.0111-0.0115g，虫体浅褐色，体长为9.45-9.49mm，头壳宽度为0.9589-0.95931mm，5龄幼虫每头体0.0242-0.0246g，体长11.75-11.79mm，头壳宽度1.2187-1.2191mm，虫体黑褐色。
11、进一步地，步骤3的具体过程为：
12、利用待鉴昆虫头壳宽度数据，基于dyar法则鳞翅目幼虫相邻龄级的头壳宽度存在几何级数关系，用r语言4.2.3，将幼虫头壳宽度测定值整理成由小到大排列的频次分布表，绘制幼虫头壳宽度的频数分布图，根据待检测昆虫个体壳宽度均值在分布图上的位置确定其虫龄，并通过brooks指数和crosby指数和回归分析来验证分龄的合理性，crosby指数大于10％表示分龄指标不合理，xn和xn-1分别表示第n龄和n-1龄幼虫头壳宽度的
13、平均值，bn和bn-1分别表示第n和n-1个brooks指数。
14、一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法的应用，用于鉴定不同来源的形态特征相似的昆虫是否为产茶经济昆虫双直巢螟。
15、一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法的应用，用于虫茶生产过程中虫源的收集、饲养、繁殖、销售或者产茶的生产过程中虫种和虫龄的鉴定。
16、一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法的应用，用于昆虫养殖过程精确划分虫龄，分虫龄进行销售，提高虫源商品收益。
17、一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法的应用，虫茶生产过程中精确划分虫龄，根据不同虫龄的生长发育特点及不同龄期取食速率等控制投喂饲料量，控制代谢产物的质量，降低生产成本，提高商品产出和商品质量。
18、本发明由于采用了上述技术方案，具有以下有益效果：
19、本发明基于dyar法则通过对双直巢螟幼虫的头壳宽度进行测量并进行频数分布分析，绘制幼虫头壳宽度的频数分布图来确定推测幼虫的分龄，并通过brooks指数和crosby指数和回归分析来验证分龄的合理性，精确划分虫龄，分虫龄进行销售、饲养和购买，提高虫源商品收益。
技术特征：
1.一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法，其特征在于：所述方法包括如下步骤：
2.根据权利要求1所述的一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法，其特征在于：步骤1的具体过程为：
3.根据权利要求1所述的一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法，其特征在于：步骤2的具体过程为：
4.根据权利要求1所述的一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法，其特征在于：步骤3的具体过程为：
5.根据权利要求1-4任意一项所述的一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法的应用，其特征在于：用于鉴定不同来源的形态特征相似的昆虫是否为产茶经济昆虫双直巢螟。
6.根据权利要求1-4任意一项所述的一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法的应用，其特征在于：用于虫茶生产过程中虫源的收集、饲养、繁殖、销售或者产茶的生产过程中虫种和虫龄的鉴定。
7.根据权利要求1-4任意一项所述的一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法的应用，其特征在于：用于昆虫养殖过程精确划分虫龄，分虫龄进行销售，提高虫源商品收益。
8.根据权利要求1-4任意一项所述的一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法的应用，其特征在于：虫茶生产过程中精确划分虫龄，根据不同虫龄的生长发育特点及不同龄期取食速率等控制投喂饲料量，控制代谢产物的质量，降低生产成本，提高商品产出和商品质量。
技术总结
本发明提供一种产茶经济昆虫虫龄的鉴定方法及其应用，属于经济昆虫鉴定技术领域，所述方法包括如下步骤：步骤1：通过分子生物学的方法确定待鉴定昆虫为产茶经济昆虫双直巢螟，步骤2：通过形态学初步分析虫龄，步骤3：基于幼虫头壳宽度的Dyar分析法精准确定虫龄。本发明基于Dyar法则通过对双直巢螟幼虫的头壳宽度进行测量并进行频数分布分析，绘制幼虫头壳宽度的频数分布图来确定推测幼虫的分龄，并通过Brooks指数和Crosby指数和回归分析来验证分龄的合理性，精确划分虫龄，分虫龄进行销售、饲养和购买，提高虫源商品收益。
技术研发人员：温立香,陈燕,张栩浩,陈家献,袁冬寅,张芬,彭靖茹,黄寿辉,欧淑琼
受保护的技术使用者：广西壮族自治区亚热带作物研究所（广西亚热带农产品加工研究所）
技术研发日：
技术公布日：2024/12/5