新型冠状病毒重组嵌合抗原、其制备方法和应用与流程

本技术属于生物医药工程领域，特别涉及包含源自不同新型冠状病毒毒株的s蛋白的受体结合结构域(rbd)或其功能活性片段以及n端结构域(ntd)或其功能活性片段的重组嵌合抗原、其制备方法和其在免疫治疗及预防领域的应用。

背景技术：

1、新型冠状病毒(sars-cov-2)感染可以导致急性呼吸道传染病。新型冠状病毒属于冠状病毒科β-冠状病毒属，具有囊膜，是正链rna病毒。

2、sars-cov-2刺突蛋白(s蛋白)的受体结合结构域(rbd)被认为是诱导机体产生中和抗体的最主要的抗原靶区域。rbd作为疫苗能够将机体刺激产生的中和抗体更加聚焦在针对病毒的受体结合，可以提高疫苗的免疫原性和免疫效率。sars-cov-2刺突蛋白(s蛋白)的n端结构域(ntd)为病毒s蛋白n端的一段序列，其可与宿主细胞的蛋白或糖蛋白结合，介导病毒入侵宿主细胞，故该段区域可能包含诱导中和抗体产生的表位。

3、新型冠状病毒具有多种变异毒株，其中omicron变异株突变位点的数量在病毒s蛋白上就多达37处，对基于新型冠状病毒原型株开发的中和抗体药物和疫苗激活的体液免疫反应都有严重的免疫逃逸。然而，有研究报道，以omicron序列开发的疫苗激活的免疫反应虽然对omicron变异株较强，但是对原型毒株以及其它毒株的交叉反应很弱，不适应当前原型株和多种变异株共存，且流行变异株仍在较快变化的情况，因此，需要研发一款针对当前的全球流行株均具有较强保护效果，可以诱导广谱的免疫反应的疫苗，这对于新型冠状感染的防控可以起到至关重要的作用。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供一种新型冠状病毒重组嵌合抗原，包含其的免疫原性组合物、制备方法及应用。根据本发明的重组嵌合抗原是由源自至少一种新型冠状病毒毒株的表面刺突蛋白的受体结合区rbd或其功能活性片段，以及源自另一种新型冠状病毒毒株的表面刺突蛋白的n端结构域ntd或其功能活性片段通过适当的连接序列或者直接串联而成。其能够更高效地激活广谱保护性抗体，尤其对原型株、d614g变异株以及当前的各种omicron亚型变异株都能起到很好的预防或治疗效果。

2、本发明的技术方案如下：

3、本发明第一方面提供一种新型冠状病毒重组嵌合抗原，包含新型冠状病毒毒株的表面刺突蛋白的受体结合区rbd或其功能活性片段以及n端结构域ntd或其功能活性片段，其中所述受体结合区rbd或其功能活性片段与所述n端结构域ntd或其功能活性片段源自不同的新型冠状病毒毒株，且至少一个源自omicron变异株。

4、在一些实施方式中，所述omicron变异株包括亚型变异株ba.1、ba.1.1、ba.2、ba.2.12.1、ba.3、ba.4、ba.5、bq.1.1、bf.7、xbb.1.5、xbb.1.16、eg.5和jn.1中的至少一种，其它的毒株选自新型冠状病毒原型株、alpha变异株、beta变异株、gamma变异株、delta变异株、lambda变异株、mu变异株中的至少一种。

5、在一些实施方式中，所述rbd或其功能活性片段源自原型株、beta变异株、delta变异株和omicron变异株中的至少一种，所述ntd或其功能活性片段源自omicron变异株。

6、在一些实施方式中，所述重组嵌合抗原包括源自不同新型冠状病毒毒株的表面刺突蛋白的受体结合区rbd或其功能活性片段的第一氨基酸序列a-b和第二氨基酸序列c-d，其中：c-d通过取代a-b中的氨基酸残基，直接或通过连接序列间接嵌合在a-b中形成a-(c-d)n-b，n表示氨基酸序列c-d的个数，n为≥1的整数；优选地，n为选自1-10的整数；进一步优选为选自1-5的整数。

7、在一些实施方式中，所述重组嵌合抗原还包括源自不同新型冠状病毒毒株的表面刺突蛋白的受体结合区rbd或其功能活性片段的第三氨基酸序列e-f，其中：e-f通过取代a-b中的氨基酸残基，直接或通过连接序列间接嵌合在a-b中形成a-(c-d)n-(e-f)m-b，m表示氨基酸序列e-f的个数，m为≥1的整数；优选地，m为选自1-10的整数；进一步优选为选自1-5的整数。

8、在一些实施方式中，c-d或e-f的氨基酸残基数为10n60个，例如10个氨基酸残基、15个氨基酸残基、20个氨基酸残基、25个氨基酸残基、30个氨基酸残基、35个氨基酸残基、40个氨基酸残基、45个氨基酸残基、50个氨基酸残基、55个氨基酸残基或60个氨基酸残基。

9、在一些实施方式中，所述rbd或其功能活性的n端与所述ntd或其功能活性片段的c端直接相连或通过连接序列相连。

10、在一些实施方式中，所述omicron变异株选自bq.1.1、bf.7、xbb.1.5、xbb.1.16、eg.5和jn.1中的至少一种。

11、在一些优选的实施方式中，所述重组嵌合抗原还包含foldon结构域或其功能活性片段。

12、在一些实施方式中，所述foldon结构域或其功能活性片段的n端与所述rbd或其功能活性片段的c端直接相连或通过连接序列相连，所述rbd或其功能活性的n端与所述ntd或其功能活性片段的c端直接相连或通过连接序列相连。在一些优选的具体实施方式中，所述连接序列为gsgsg。

13、在一些实施方式中，所述重组嵌合抗原的rbd或其功能活性片段源自omicron变异株的bq.1.1亚型变异株，ntd或其功能活性片段源自omicron变异株的xbb.1.5亚型变异株，所述重组嵌合抗原为ntd(xbb.1.5)-rbd(bq.1.1)。在所述重组嵌合抗原包含foldon结构域或其功能活性片段的情况下，所述重组嵌合抗原为ntd(xbb.1.5)-rbd(bq.1.1)-foldon。

14、在一些实施方式中，所述重组嵌合抗原的rbd或其功能活性片段源自omicron变异株的xbb.1.5亚型变异株，ntd或其功能活性片段源自omicron变异株的bq.1.1亚型变异株，所述重组嵌合抗原为ntd(bq.1.1)-rbd(xbb.1.5)。在所述重组嵌合抗原包含foldon结构域或其功能活性片段的情况下，所述重组嵌合抗原为ntd(bq.1.1)-rbd(xbb.1.5)-foldon。

15、在一些实施方式中，所述重组嵌合抗原的rbd或其功能活性片段源自omicron变异株的xbb.1.16亚型变异株，ntd或其功能活性片段源自omicron变异株的xbb.1.5亚型变异株，所述重组嵌合抗原为ntd(xbb.1.5)-rbd(xbb.1.16)。在所述重组嵌合抗原包含foldon结构域或其功能活性片段的情况下，所述重组嵌合抗原为ntd(xbb.1.5)-rbd(xbb.1.16)-foldon。

16、在一些实施方式中，所述重组嵌合抗原的rbd或其功能活性片段源自omicron变异株的xbb.1.5亚型变异株，ntd或其功能活性片段源自omicron变异株的xbb.1.16亚型变异株，所述重组嵌合抗原为ntd(xbb.1.16)-rbd(xbb.1.5)。在所述重组嵌合抗原包含foldon结构域或其功能活性片段的情况下，所述重组嵌合抗原为ntd(xbb.1.16)-rbd(xbb.1.5)-foldon。

17、在一些实施方式中，所述重组嵌合抗原的rbd或其功能活性片段源自原型株和omicron变异株的bq.1.1亚型变异株，ntd或其功能活性片段源自omicron变异株的xbb.1.5亚型变异株，所述重组嵌合抗原为ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株-bq.1.1)。在所述重组嵌合抗原包含foldon结构域或其功能活性片段的情况下，所述重组嵌合抗原为ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株-bq.1.1)-foldon。

18、在一些实施方式中，所述重组嵌合抗原的rbd或其功能活性片段源自原型株和omicron变异株的xbb.1.5亚型变异株，ntd或其功能活性片段源自omicron变异株的bq.1.1亚型变异株，所述重组嵌合抗原为ntd(bq.1.1)-rbd(原型株-xbb.1.5)。在所述重组嵌合抗原包含foldon结构域或其功能活性片段的情况下，所述重组嵌合抗原为ntd(bq.1.1)-rbd(原型株-xbb.1.5)-foldon。

19、在一些实施方式中，所述重组嵌合抗原的rbd或其功能活性片段源自原型株和omicron变异株的bq.1.1h和bf.7亚型变异株，ntd或其功能活性片段源自omicron变异株的xbb.1.5亚型变异株，所述重组嵌合抗原为ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株-bq.1.1-bf.7)。在所述重组嵌合抗原包含foldon结构域或其功能活性片段的情况下，所述重组嵌合抗原为ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株-bq.1.1-bf.7)-foldon。

20、在一些实施方式中，所述重组嵌合抗原的rbd或其功能活性片段源自原型株和omicron变异株的xbb.1.5和bf.7亚型变异株，ntd或其功能活性片段源自omicron变异株的bq.1.1亚型变异株，所述重组嵌合抗原为ntd(bq.1.1)-rbd(原型株-xbb.1.5-bf.7)。在所述重组嵌合抗原包含foldon结构域或其功能活性片段的情况下，所述重组嵌合抗原为ntd(bq.1.1)-rbd(原型株-xbb.1.5-bf.7)-foldon。

21、类似地，所述重组嵌合抗原还可以为ntd(xbb.1.5)-rbd(delta-bq.1.1)、ntd(bq.1.1)-rbd(delta-xbb.1.5)、ntd(xbb.1.5)-rbd(delta-bq.1.1-bf.7)、ntd(bq.1.1)-rbd(delta-xbb.1.5-bf.7)、ntd(bq.1.1)-rbd(delta-eg.5)、ntd(bq.1.1)-rbd(delta-jn.1)等。在所述重组嵌合抗原包含foldon结构域或其功能活性片段的情况下，所述重组嵌合抗原为ntd(xbb.1.5)-rbd(delta-bq.1.1)-foldon、ntd(bq.1.1)-rbd(delta-xbb.1.5)-foldon、ntd(xbb.1.5)-rbd(delta-bq.1.1-bf.7)-foldon、ntd(bq.1.1)-rbd(delta-xbb.1.5-bf.7)-foldon、ntd(bq.1.1)-rbd(delta-eg.5)-foldon、ntd(bq.1.1)-rbd(delta-jn.1)-foldon等。

22、在一些具体的实施方式中，所述重组嵌合抗原具有seq id no：1-3任一项所示的氨基酸序列。

23、本发明第二方面提供一种重组核酸，其包含编码所述重组嵌合抗原的多核苷酸序列，所述多核苷酸为经密码子优化的核苷酸序列，可以为dna、mrna或circrna。优选地，所述重组核酸的dna序列如seq id no：6-8任一项所示。

24、本发明第三方面提供一种核酸构建体，其包含如上述第二方面所述的重组核酸，及任选地，与所述重组核酸可操作地连接的至少一个表达调控元件。

25、本发明第四方面提供一种表达载体，其包含如上述第三方面所述的核酸构建体。

26、本发明第五方面提供一种宿主细胞，其包含如上述第二方面所述的编码重组嵌合抗原的核酸、如上述第三方面所述的核酸构建体或如上述第四方面所述的表达载体；所述宿主细胞包括哺乳动物细胞、昆虫细胞、酵母细胞或细菌细胞；可选地，所述哺乳动物细胞包括hek293t细胞、hek293f细胞、expi293f细胞或cho细胞；可选地，所述细菌细胞包括大肠杆菌细胞。

27、本发明第六方面提供一种制备如第一方面所述重组嵌合抗原的方法，其包括以下步骤：

28、(1)利用编码所述新型冠状病毒重组嵌合抗原的核苷酸序列构建重组表达质粒；

29、(2)将构建的重组表达质粒转化宿主菌，筛选正确的重组表达质粒；

30、(3)用筛选得到的重组表达质粒转染哺乳动物宿主细胞进行表达；

31、(4)收集细胞培养上清，纯化获得所述重组嵌合抗原。

32、本发明第七方面提供一种免疫原性组合物，其包含如上述第一方面所述的重组嵌合抗原、如上述第二方面所述的重组核酸、如上述第三方面所述的核酸构建体、如上述第四方面所述的表达载体或如上述第五方面所述的宿主细胞。

33、在一些实施方式中，所述的免疫原性组合物，其包含第一组分，所述第一组分包含源自xbb.1.5变异株的ntd或其功能活性片段和源自原型株的rbd或其功能活性片段，即ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株)；以及第二组分，所述第二组分包含源自bq.1.1变异株的ntd或其功能活性片段和源自delta变异株的rbd或其功能活性片段，即ntd(bq.1.1)-rbd(delta)。在优选的实施方式中，各组分还包含foldon结构域或其功能活性片段，即所述免疫原性组合物包含ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株)-foldon和ntd(bq.1.1)-rbd(delta)-foldon两种组分。

34、在一些实施方式中，所述的免疫原性组合物，其包含第一组分，所述第一组分包含源自xbb.1.5变异株的ntd或其功能活性片段和源自原型株的rbd或其功能活性片段，即ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株)；以及第二组分，所述第二组分包含源自xbb.1.16变异株的ntd或其功能活性片段和源自delta变异株的rbd或其功能活性片段，即ntd(xbb.1.16)-rbd(delta)。在优选的实施方式中，各组分还包含foldon结构域或其功能活性片段，即所述免疫原性组合物包含ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株)-foldon和ntd(xbb.1.16)-rbd(delta)-foldon两种组分。

35、类似地，所述的免疫原性组合物可以包含选自ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株-bf.7)、ntd(xbb.1.5)-rbd(delta-bf.7)、ntd(bq.1.1)-rbd(delta-xbb.1.5)、ntd(xbb.1.16)-rbd(delta-bf.7)、ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株-xbb.1.16)、ntd(xbb.1.5)-rbd(delta-xbb.1.16)等的至少一种组分。在优选的实施方式中，各组分还包含foldon结构域或其功能活性片段，即，各组分可以为ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株-bf.7)-foldon、ntd(xbb.1.5)-rbd(delta-bf.7)-foldon、ntd(bq.1.1)-rbd(delta-xbb.1.5)-foldon、ntd(xbb.1.16)-rbd(delta-bf.7)-foldon、ntd(xbb.1.5)-rbd(原型株-xbb.1.16)-foldon、ntd(xbb.1.5)-rbd(delta-xbb.1.16)-foldon等。在一些实施方式中，所述的免疫原性组合物还可以包含源自相同毒株的ntd或其功能活性片段以及rbd或其功能活性片段，例如ntd(原型株)-rbd(原型株)、ntd(delta)-rbd(delta)、ntd(原型株)-rbd(原型株)-foldon、ntd(delta)-rbd(delta)-foldon等。

36、本发明第八方面提供一种新型冠状病毒重组蛋白疫苗，其包括如上述第一方面所述的重组嵌合抗原，或上述第七方面所述的免疫原性组合物，以及佐剂；所述佐剂选自铝佐剂、脂多糖、皂苷、polyi：c、cpg和乳剂佐剂中的一种或任意组合。

37、在一些实施方式中，所述铝佐剂选自氢氧化铝和磷酸铝。

38、在一些实施方式中，所述皂苷选自qs-7、qs-17、qs-18、qs21、tql-1055等。在优选的实施方式中，皂苷选自qs21或tql-1055。

39、在一些实施方式中，佐剂为包含皂苷的脂质体佐剂或乳剂佐剂。

40、在一些实施方式中，人用剂量的佐剂包含qs21，其含量为5-50μg，例如6μg、7μg、8μg、9μg、10μg、11μg、12μg、13μg、14μg、15μg、16μg、17μg、18μg、19μg、20μg、21μg、22μg、23μg、24μg、25μg、26μg、27μg、28μg、29μg、30μg、31μg、32μg、33μg、34μg、35βg、36μg、37μg、38μg、39μg、40μg、41μg、42μg、43μg、44μg、44μg、45μg、46μg、47μg、48μg或49μg。

41、在一些实施方式中，所述脂多糖包含革兰阴性菌脂多糖lps、吡喃葡萄糖基脂质a(gla)、mpl(3d-mpl)。

42、在一些实施方式中，人用剂量的佐剂包含mpl，其含量为1-50μg，例如2μg、3μg、4μg、5μg、6μg、7μg、8μg、9μg、10μg、11μg、12μg、13μg、14μg、15μg、16μg、17μg、18μg、19μg、20μg、21μg、22μg、23μg、24μg、25μg、26μg、27μg、28μg、29μg、30μg、31μg、32μg、33μg、34μg、35μg、36μg、37μg、38μg、39μg、40μg、41μg、42μg、43μg、44μg、44μg、45μg、46μg、47μg、48μg或49μg。

43、在一些实施方式中，包含皂苷的脂质体佐剂具体含有qs21和mpl。

44、在一些实施方式中，人用剂量的免疫原性组合物包含25μg mpl和25μgqs21。在另一些实施方案中，人用剂量的免疫原性组合物包含10μg mpl和10μg qs21。

45、在一些实施方式中，脂质体含有中性脂质，例如磷脂酰胆碱，所述磷脂酰胆碱可以选自例如卵黄磷脂酰胆碱、二油酰磷脂酰胆碱(dopc)或二月桂酰磷脂酰胆碱。

46、在一些实施方式中，脂质体含有甾醇，合适的甾醇包括p-谷甾醇、豆甾醇、麦角甾醇、麦角钙化甾醇和胆固醇。在优选的实施方案中，佐剂组合物包含胆固醇作为甾醇。

47、在一些实施方式中，包含皂苷的脂质体佐剂包含tql-1055和mpl。

48、在一个优选的实施例中使用1人用剂量as01佐剂成分为每0.5ml包括50μg mpl、50μg qs21、1mg dopc和0.25mg胆固醇的pbs缓冲液。

49、在一些实施方式中，所述乳剂中含有油相和水相。

50、在一些实施方式中，所述油相包含可代谢油，优选地，所述可代谢油为角鲨烯。

51、在一些实施方式中，其中，所述油相进一步包含α-生育酚。

52、在一些实施方式中，其中，角鲨烯与α-生育酚的重量比为0.8-1，例如0.85-0.95，优选为0.9，使用1人用剂量as03乳剂成分为每0.5ml含有4.86mg聚山梨酯80(吐温80)、10.69mg角鲨烯和11.86mg α-生育酚。

53、在一些实施方式中，其中，所述油相进一步包含司盘85，优选的，水包油乳剂为mf59，包含1％角鲨烯、0.5％吐温80和0.5％司盘85。

54、在一些实施方式中，其中，角鲨烯与司盘85的重量比为8-10，优选为8.4。

55、在一些实施方式中，包含皂苷的乳剂佐剂包含qs21和mpl。

56、在一些实施方式中，乳剂佐剂包含角鲨烯、生育酚和吐温80。

57、在一些实施方式中，乳剂佐剂为包含角鲨烯、司盘85和吐温80的水包油乳剂。

58、在一些实施方式中，佐剂包含铝佐剂和3d-mpl。

59、在一些实施方式中，佐剂包含乳剂和均匀分散于所述乳剂中的纳米铝颗粒。

60、在一些实施方式中，乳剂包含角鲨烯、生育酚、吐温80和司盘85。

61、在一些实施方式中，佐剂包含polyi：c和3d-mpl。

62、本发明第九方面提供一种新型冠状病毒重组核酸疫苗，其包含如第二方面所述的重组核酸。

63、在一些实施例中，所述重组核酸疫苗为dna疫苗，其包含真核表达载体和构建入所述真核表达载体中的、编码如上述第一方面所述的重组嵌合抗原的dna序列；可选地，所述真核表达载体选自pgx0001、pvax1、pcaggs和pcdna系列载体。

64、在一些实施例中，所述重组核酸疫苗为mrna疫苗，其包含编码如上述第一方面所述的重组嵌合抗原的mrna序列和脂质纳米颗粒(lnp)，所述mrna包封于脂质纳米颗粒(lnp)中。

65、在一些实施例中，所述重组核酸疫苗为circrna疫苗，其包含编码如上述第一方面所述的重组嵌合抗原的环状rna序列。

66、本发明第十方面提供一种如上述第一方面所述的重组嵌合抗原、如上述第二方面所述的重组核酸、如上述第三方面所述的核酸构建体、如上述第四方面所述的表达载体、如上述第五方面所述的宿主细胞、如上述第七方面所述的免疫原性组合物、如上述第八方面所述的新型冠状病毒重组蛋白疫苗、如上述第九方面所述的新型冠状病毒重组核酸疫苗在制备用于预防新型冠状病毒感染的药物中的用途。

67、相比现有技术，本发明具有如下有益效果：

68、本发明筛选出了具有免疫优势的ntd序列和rbd序列，相应的重组嵌合抗原的免疫原性强且广谱，可以针对新型冠状病毒不同毒株提供较为平衡且高效的保护作用，尤其是各种omicron变异株，甚至是共同含有关键突变位点d614g的alpha、beta和delta变异株。

技术特征：

1.一种新型冠状病毒重组嵌合抗原，包含新型冠状病毒毒株的表面刺突蛋白的受体结合区rbd或其功能活性片段以及n端结构域ntd或其功能活性片段，其中所述受体结合区rbd或其功能活性片段与所述n端结构域ntd或其功能活性片段源自不同的新型冠状病毒毒株，且至少一个源自omicron变异株。

2.如权利要求1所述的重组嵌合抗原，其特征在于，所述omicron变异株包括亚型变异株ba.1、ba.1.1、ba.2、ba.2.12.1、ba.3、ba.4、ba.5、bq.1.1、bf.7、xbb.1.5、xbb.1.16、eg.5和jn.1中的至少一种，其余毒株选自新型冠状病毒原型株、alpha变异株、beta变异株、gamma变异株、delta变异株、lambda变异株、mu变异株中的至少一种。

3.如权利要求1所述的重组嵌合抗原，其特征在于，所述rbd或其功能活性片段源自原型株、beta变异株、delta变异株和omicron变异株中的至少一种，所述ntd或其功能活性片段源自omicron变异株。

4.如权利要求3所述的重组嵌合抗原，其特征在于，所述重组嵌合抗原包括源自不同新型冠状病毒毒株的表面刺突蛋白的受体结合区rbd或其功能活性片段的第一氨基酸序列a-b和第二氨基酸序列c-d，其中：c-d通过取代a-b中的氨基酸残基，直接或通过连接序列间接嵌合在a-b中形成a-(c-d)n-b，c-d的氨基酸残基数为10～60个，n表示氨基酸序列c-d的个数，n为≥1的整数；优选地，n为选自1-10的整数，进一步优选为选自1-5的整数。

5.如权利要求4所述的重组嵌合抗原，其特征在于，所述重组嵌合抗原还包括源自不同新型冠状病毒毒株的表面刺突蛋白的受体结合区rbd或其功能活性片段的第三氨基酸序列e-f，其中：e-f通过取代a-b中的氨基酸残基，直接或通过连接序列间接嵌合在a-b中形成a-(c-d)n-(e-f)m-b，e-f的氨基酸残基数为10～60个，m表示氨基酸序列e-f的个数，m为≥1的整数；优选地，m为选自1-10的整数；进一步优选为选自1-5的整数。

6.如权利要求4或5所述的重组嵌合抗原，其特征在于，所述omicron变异株选自bq.1.1、bf.7、xbb.1.5、xbb.1.16、eg.5和jn.1中的至少一种。

7.如权利要求1-6任一项所述的重组嵌合抗原，其特征在于，所述重组嵌合抗原还包含foldon结构域或其功能活性片段。

8.如权利要求7所述的重组嵌合抗原，其特征在于，所述foldon结构域或其功能活性片段的n端与所述rbd或其功能活性片段的c端直接相连或通过连接序列相连，所述rbd或其功能活性的n端与所述ntd或其功能活性片段的c端直接相连或通过连接序列相连。

9.如权利要求8所述的重组嵌合抗原，其特征在于，所述重组嵌合抗原具有seq id no：1-3中任一项所示的氨基酸序列。

10.一种重组核酸，其包含编码权利要求1～9中任一项所述的重组嵌合抗原的多核苷酸序列，所述多核苷酸为dna、mrna或circrna。

11.一种宿主细胞，其携带有权利要求10所述的重组核酸，所述宿主细胞包括哺乳动物细胞、昆虫细胞、酵母细胞或细菌细胞；可选地，所述哺乳动物细胞包括hek293t细胞、hek293f细胞、expi293f细胞或cho细胞；可选地，所述细菌细胞包括大肠杆菌细胞。

12.一种制备权利要求1-9中任一项所述重组嵌合抗原的方法，其包括以下步骤：

13.一种免疫原性组合物，其包含第一组分和第二组分，所述第一组分和第二组分不相同，且至少一种组分选自权利要求1-9中任一项所述的重组嵌合抗原。

14.一种新型冠状病毒重组蛋白疫苗，包括权利要求1-9中任一项所述重组嵌合抗原、或权利要求13所述的免疫原性组合物，以及佐剂；所述佐剂选自铝佐剂、脂多糖、皂苷、polyi：c、cpg和乳剂佐剂中的一种或任意组合。

15.一种新型冠状病毒重组核酸疫苗，其包含权利要求10所述的重组核酸。

16.权利要求1-9中任一项所述的重组嵌合抗原、权利要求10所述的重组核酸、权利要求11所述的宿主细胞、权利要求13所述的免疫原性组合物、权利要求14所述的新型冠状病毒重组蛋白疫苗、权利要求15所述的新型冠状病毒重组核酸疫苗在制备用于预防新型冠状病毒感染的药物中的用途。

技术总结
本发明涉及一种新型冠状病毒重组嵌合抗原、其制备方法和应用。本发明所述重组嵌合抗原包含新型冠状病毒毒株的表面刺突蛋白的受体结合区RBD或其功能活性片段以及N端结构域NTD或其功能活性片段，其中所述受体结合区RBD或其功能活性片段与所述N端结构域NTD或其功能活性片段源自不同的新型冠状病毒毒株，且至少一个源自Omicron变异株。本发明的重组嵌合抗原能够更高效地激活广谱保护性抗体，对D614G变异株以及多种Omicron亚型变异株都能起到很好的预防或治疗效果。

技术研发人员：罗士强,邓家荔,吴双,张元杰,郗永义,姚文荣,胡颖嵩,洪坤学,刘勇
受保护的技术使用者：江苏瑞科生物技术股份有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/12/5